identification of burkholderia mallei isolates with polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism

Burkholderia mallei is the main cause of glanders as a dangerous contagious zoonosis disease that is mostly observed in single-hoofed animals, especially horses. modern molecular techniques have been recently employed to improve epidemiology for identifying and searching for strains of this bacterium at different times and locations. due to the unknown number of circulating strains and lack of preventive methods, glanders is still observed in the form of epidemics. the present study aimed to evaluate six field isolates plus two laboratory strains of borkolderia mallei and burkholderia pseudomallei using the polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (pcr-rflp) method. all the isolates and strains were microbially cultured in the glycerol nutrient and glycerol agar media. the individually grown colonies of the bacterium were used in the biochemical tests. the dna of isolates was extracted by boiling, and the pcr-rflp test was conducted on their genome. finally, the bacterium was injected into guinea pigs to induce the straus reaction. the biochemical assays (or bioassays) confirmed the isolates as burkholderia mallei. the pcr-rflp assay demonstrated a product for burkholderia mallei with a length of 650 bp. nevertheless, 250 and 400 bp were produced for burkholderia pseudomallei. the swollen scrotum pointed to the occurrence of the straus reaction. the pcr-rflp is a proper differential diagnosis technique for b. mallei; moreover, it is a suitable method for differentiating between burkholderia mallei and burkholderia pseudomallei. this technique can detect burkholderia mallei in a short time with high precision and sensitivity.

تعیین هویت جدایه های بورخولدریا مالئی با pcr-چندریختی طولی قطعات بریده شده

باکتری بورخولدریا مالئی عامل ایجاد کننده مشمشه است. مشمشه بیماری باکتریایی واگیردار و خطرناکی است که بیشتر در تک سمی‌ها بخصوص اسب‌ها مشاهده می‌گردد و بیماری مشترک بین انسان و دام است. در سال‌های اخیر به منظور افزایش سطح دانش اپیدمیولوژی از تکنیک‌ها و ابزارهای مدرن مولکولی برای شناسایی و جست‌وجو سویه‌های این باکتری در مکان و زمان‌های استفاده شده است. به علت معلوم نبودن تعداد سویه‌های در گردش و عدم پیشگیری از بیماری، هنوز بیماری به صورت اپیدمی‌های کوتاه و نقطه‌ای مشاهده می‌شود. کشت میکروبی جدایه‌ها و سویه استاندارد بورخولدریا مالئی و سویه بورخولدریا سودومالئی در محیط‌ کشت نوترینت گلیسرینه و آگار گلیسرینه انجام گرفت. از کلنی‌های انفرادی باکتری رشد یافته در اجرای آزمایشات بیوشیمیایی استفاده شد. dna جدایه‌ها به روش جوشاندن استخراج شد و آزمون pcr-rflp برای ژنوم آنها انجام گرفت. در نهایت، باکتری به خوکچه هندی جهت ایجاد واکنش اشتراوس تزریق شد. آزمون‌های بیوشیمیائی، جدایه‌ها را به عنوان باکتری بورخولدریا مالئی تائید نمود. در آزمون pcr-rflp، برای بورخولدریا مالئی محصولی با طول 650 جفت باز را نشان داد، این در حالی بود که برای بورخولدریا سودومالئی دو قطعه 250 و 400 جفت باز ایجاد گردید. مشاهده تورم کیسه بیضه خوکچه هندی، بیانگر پدیده اشتروس و رشد باکتری در پرده‌های کیسه بیضه بود. تکنیک pcr-rflp یک روش تفریقی مناسب در تشخیص بورخولدریا مالئی است که این روش راه تفرقی مناسبی برای دو گونه بورخولدریا مالئی و بورخولدریا سودومالئی می‌باشد. این روش، در یک زمان کوتاه با دقت و حساسیت بالا می‌تواند باکتری بورخولدریا مالئی را شناسایی کند.