synthesis and evaluation of the immunomagnetic beads for separation of the salmonella typhimurium from milk

Salmonella causes zoonotic diseases in humans and many animal species. the bacteria could be spread through fecal-oral transmission and consumption of raw contaminated animal products. despite the activities which are carried out for the prevention of salmonellosis, it causes economic losses. this study aimed to prepare immunomagnetic beads to separate the salmonella bacteria from experimentally polluted milk samples. the antibodies were purified from the rabbit’s hyperimmune sera and coupled to the fe nanoparticles using diethylenetriaminepentaacetic acid (dtpa) as a linker. the synthesized particles were analyzed using electron microscopy. the limit of bacterial detection by using the immunomagnetic beads coupled with bacterial culture were tested in experimentally contaminated cow milk with salmonella. the separated bacteria were identified by using bacterial culture and biochemical tests. using immunomagnetic beads (imb), the salmonella bacteria were removed from milk samples, concentrated in sterilized pbs, and cultured in nutrient agar media. the conventional culture method detected the bacteria in samples polluted with at least 3×104 cfu/ml bacteria; however, isolated bacteria were separated from milk samples using imb and defined on bacterial culture media. the 3 cfu/ml of s. typhimurium were detected in experimentally polluted milk samples using the current immunomagnetic-culture method. the results suggested using the imb-bacterial culture instead of the conventional culture method.

تولید و ارزیابی ذرات ایمونومگنت برای جداسازی سالمونلا تیفی موریوم از شیر

سالمونلا عامل بیماری‌های مشترک در انسان و گونه های حیوانی است. باکتری از راه انتقال مدفوعی-دهانی و مصرف محصولات حیوانی آلوده خام گسترش می‌یابد. با وجود اقداماتی که برای پیشگیری سالمونلوز انجام می‌شود، این باکتری باعث زیان‌های اقتصادی می شود. این مطالعه با هدف تهیه ذرات ایمونومگنت برای جداسازی باکتری سالمونلا از نمونه های شیر با آلودگی تجربی انجام شده است.آنتی بادی‌ها از سرم خرگوش هیپرایمن خالص‌سازی شدند و با استفاده از dtpa به عنوان واسطه به نانوذرات fe متصل شدند. ذرات تولید شده با میکروسکوپ الکترونی مورد بررسی قرار گرفتند. حد تشخیص باکتری با استفاده از ذرات ایمونومگنت در همراهی با کشت شیر گاو حاوی آلودگی تجربی با سالمونلا ارزیابی شد. باکتری های جدا شده با استفاده از کشت باکتریایی و آزمایش‌های بیوشیمیایی شناسایی شدند. با استفاده از ذرات ایمونومگنت، باکتری‌های سالمونلا در بافر فسفات سالین استریل جمع‌آوری و در محیط کشت آگارمغذی کشت داده شدند. ردیابی نمونه دارای حداقل 104×3 باکتری در هر میلی‌لیتر با روش معمول کشت باکتری، انجام شد. با این حال، تمام غلظت‌های باکتری با استفاده از ذرات ایمونومگنت از نمونه‌های شیر جدا شدند و بر روی محیط کشت تشخیص داده شدند.با استفاده از روش کنونی ایمونومگنت-کشت، 3 واحد تشکیل دهنده کلونی از باکتری سالمونلا تیفی‌موریوم در هر میلی‌لیتر از شیر آلوده تجربی در محیط کشت شناسایی شدند. نتایج حاصل شده بکارگیری imb-کشت یاکتری را به‌جای کشت معمول باکتری پیشنهاد می‌نماید.