extraction, purification, and characterization of trypsin obtained from the digestive system of yellowfin seabream (acanthopagrus latus)

The development of the marine aquaculture industry has led to the generation of significant amounts of fish wastes. marine farm wastes exert adverse effects on the surrounding area of the cages. on the other hand, wastes of fish and other aquatic animals are regarded as major sources of valuable natural bioactive compounds, including enzymes, proteins, bioactive peptides, oil, amino acids, collagen, gelatin, calcium, biopolymers, and water-soluble minerals. to investigate the potential of marine fish waste, the whole digestive system of yellowfin seabream (acanthopagrus latus) was extracted for extraction and identification of trypsin enzyme. fish (179.93±93.67 g; 184±28.17 cm) were caught from the persian gulf and stored at -20 °c. yellowfin seabream were dissected and their whole digestive systems were removed. samples were thoroughly washed with distilled water and purified through defatting using acetone and ammonium sulfate precipitation. the following issues were assessed: the total and specific activity of trypsin, protein determination, molecular weight, enzyme activity and stability in different ph values and temperatures. the obtained results indicated that specific activity and protein content of trypsin enzyme were 4.4 u and 3.4 mg/ml, respectively. the molecular weight of 23 kda was reported for trypsin using sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (sds-page) method. maximum activity and stability of trypsin were observed at 60°c and 45°c, respectively. trypsin demonstrated maximum activity and stability at a ph value of 8.0. in general, the results of the current study suggested that trypsin extracted from the digestive system of yellowfin seabream has considerable potential for industrial applications, such as the food industry, owing to its characteristics and stability under alkaline conditions.

استخراج، خالص سازی و شناسایی ویژگی‌های تریپسین حاصل از سیستم گوارش ماهی شانک زرد باله (Acanthopagrus latus)

توسعه صنعت آبزی‌پروری دریایی منجر به تولید مقادیر قابل‌توجهی از ضایعات آبزیان شده است. ضایعات مزارع دریایی اثرات بدی بر محیط اطراف قفس‌ها می‌گذارند. از طرف دیگر ضایعات ماهی‌ها و سایر موجودات دریایی به‌عنوان منبع عظیمی از ترکیبات زیست فعال باارزشی شامل آنزیم‌ها، پروتئین‌ها، پپتیدهای زیست فعال، روغن، آمینواسید، کلاژن، ژلاتین، کلسیم، بیوپلیمرها و مواد معدنی محلول در آب شناخته می‌شوند. برای بررسی پتانسیل موجود در ضایعات ماهی‌ها، دستگاه گوارش ماهی شانک زرد باله (Acanthopagrus latus) جهت استخراج و شناسایی آنزیم تریپسین، استخراج گردید. ماهی‌ها (میانگین وزن 67/93±93/179 گرم و میانگین طول 67/93±184 سانتی‌متر) از خلیج‌فارس صید شده و در دمای 20 نگهداری شدند. ماهی‌های شانک زرد باله کالبدشکافی شده و کل دستگاه گوارش آن‌ها خارج گردید. نمونه‌ها به‌طور کامل با آب مقطر شسته شدند و از طریق چربی زدایی با استون و ترسیب با آمونیوم سولفات خالص‌سازی انجام شد. مواردی که مورد بررسی قرار دادیم شامل فعالیت کل و فعالیت اختصاصی تریپسین، پروتئین سنجی، وزن مولکولی، فعالیت آنزیمی و پایداری در pH متفاوت و فعالیت آنزیمی و پایداری در دماهای متفاوت بود. نتایج نشان داد که فعالیت اختصاصی و محتوای پروتئین آنزیم تریپسین به ترتیب U 4/4 و mg/ml 4/3 بود. وزن مولکولی آنزیم تریپسین با استفاده از روش SDSPAGE معادل 23 کیلو دالتون تعیین گردید. حداکثر فعالیت و پایداری تریپسین به ترتیب در دمای 60 و 45 درجه سانتی گراد مشاهده گردید. تریپسین بالاترین فعالیت و پایداری را در pH برابر با 8 نشان داد. به‌طور کلی این مطالعه نشان داد که تریپسین استخراج شده از دستگاه گوارش ماهی شانک زرد باله با توجه به مشخصات آن و پایداری در شرایط قلیایی، دارای پتانسیل بالایی برای استفاده در صنایع غذایی و سایر صنایع است.