development of indirect immunofluorescence technique for the identification of mrc5 working seed cell

Diploid and continuous cell lines are used to propagate viral vaccines. at human viral vaccine department of razi vaccine and serum research institute, mrc5 diploid cell is used for the development of live attenuated measles, mumps, rubella, and three types of poliovirus vaccines.  additionally, three continuous cell lines (i.e., rk13, hela, and vero) are applied in quality control tests. accordingly, cell crosscontamination can occur at cell culture labs, hence controlling the identity and specificity of cells is essential. indirect immunofluorescence is a sensitive, specific, and simple test for cell identification. the present study was designed to develop the inhouse indirect immunofluorescence test (iif) as follows: homemade polyclonal antimrc5 serum was prepared in rabbits, and crossreactive antibodies to rk13, hela, and vero cells were eliminated. the diploid and continuous cell lines were fixed on teflon slide using cold methanol and acetone. the reproducibility of the inhouse iif test was evaluated using the agreement kappa test.  the purity of the three batches of mrc5 working seed cell at human viral vaccine department of razi institute was verified using iif and no contamination with continuous cell lines was detected.

راه اندازی تست ایمونوفلورسانس غیر مستقیم در تایید هویت بذر سلول های فیبروبلاست ریه جنین انسان

سلول دیپلویید فیبروبلاست ریه جنین انسان (MRC5) و سلول های لاین در پروسه تولید واکسن های ویروسی به کار می روند، اما در آزمایشگاه ها احتمال آلودگی سلول ها باهم وجود دارد. به همین دلیل روش های زیادی برای تایید هویت سلول ها وجود دارد که یکی از آنها تست ایمونوفلورسانس غیر مستقیم (IIFT) می باشد. به منظور تایید خصوصیات بانک بذرهای کاری سلول دیپلویید فیبروبلاست ریه جنین انسان موجود در بخش تولید واکسن­های ویروسی موسسه رازی با روش تست ایمونوفلورسانس غیر مستقیم، سرم پلی کلونال اختصاصی سلول دیپلویید فیبروبلاست ریه جنین انسان در خرگوش، بعنوان آنتی بادی اولیه تهیه شد. پس از تعیین بهترین تیتر آنتی بادی، خصوصیات بانک سلول دیپلویید فیبروبلاست ریه جنین انسان موجود در بخش تولید واکسن های ویروسی انسانی موسسه رازی بررسی شد. ضمن تایید هویت سلول دیپلویید فیبروبلاست ریه جنین انسان، هیچ آلودگی با سایر سلول های لاین در بذرهای کاری سلول دیپلویید فیبروبلاست ریه جنین انسان مشاهده نشد.