به کارگیری روش سریع و حساس Real time PCR در تشخیص ناخالصی های DNA در اینترفرون نوترکیب

زمینه و هدف: اینترفرون‌ها خانواده‌ای از سایتوکاین‌ها هستند که درپاسخ ایمنی به عفونت‌های ویروسی نقش اساسی دارند. در جریان تولید اینترفروننوترکیب در میزبان بیولوژیک، قطعاتی از اسیدنوکلئیک میزبان وارد محصول می‌شود. به علتوجود محدودیت‌های روش‌های قبلی در تشخیص این آلودگی‌ها، هدف از این مطالعه،استفاده از روش مولکولی سریع و حساس real time pcr در این ناخالصی‌ها می‌باشد.   مواد و روش‌ها: ابتدا با استخراج dna از میزبان باکتریایی و تهیه رقت‌های متوالی از آن، واکنش real time pcr به کمک رنگ sybr green i انجام گرفت و منحنی استاندارد رسم گردید. پس از استخراج dna از اینترفرون و انجام واکنش pcr، میزان dna به کمک منحنی استاندارد، تعیین گردید.   نتایج: بررسی‌های انجام شده بر روی چند نمونه اینترفرون، میزانآلودگی dna را حدود 02/0 پیکوگرم در هر دوز محصول نشان داد. همچنین پرایمرهایطراحی شده در واکنش فوق، هیچ گونه واکنشی با یکدیگر و سایر عوامل مداخله کنندهنشان ندادند.  نتیجه‌گیری: مطالعه فوق برای اولین بار در ایران بهینه سازی شد و نشانداد که تکنیک real time pcr می‌تواند به عنوان یک روش کاربردی و بسیار دقیق در مراکز تولیدیجهت تشخیص ناخالصی‌های dna ناشی از میزبان، در اینترفرون و سایر محصولات دارویی نوترکیب به کاربرده شود.