|
|
|
|
کلونینگ و بیان آنتی‌ژن LipL32 لپتوسپیرائی به عنوان کاندیدی برای تشخیص سریع بیماری
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
سهرابی نوشین ,عظیمی شهره
|
|
منبع
|
journal of advanced biomedical sciences - 1392 - دوره : 3 - شماره : 2 - صفحه:124 -129
|
|
چکیده
|
زمینه و هدف: یکی از مشکلات اصلی در بیماری لپتوسپیروزیس، دشواری تشخیص آن است که باعث شده این بیماری به عنوان یک چالش در سلامت انسان و دام مطرح باشد. با توجه به مشکلات موجود در آزمون آگلوتیناسیون میکروسکوپی (mat) که روش معمول در تشخیص این عفونت است، تلاش‌های فراونی در جهت طراحی و اجرای روش‌های دقیق و سریع تشخیصی انجام شده است. با توجه به این که پروتئین غشای خارجیlipl32 می‌تواند به عنوان کاندید مناسبی برای مصارف تشخیصی محسوب شوند، در این مطالعه قصد بر این است که این آنتی‌ژن را کلون و بیان نماییم. مواد و روش‌ها: ابتدا ژن lipl32 بوسیله پرایمرهای اختصاصی و روش pcr تکثیر گردید و سپس در داخل وکتور بیانی pqe30 کلون گردید و با استفاده از آزمون‌های کنترلی جهت قرار‌گیری قطعه مربوطه مورد تایید قرار گرفت. برای بیان پروتئین مورد نظر، پلاسمید نوترکیب ایجاد شده در درون میزبان مناسب (e.coli m15)، وارد و سپس بیان شد. نتایج: پروتئین بیان شده با استفاده از آزمون الکتروفورز sds-page مورد بررسی قرار گرفت و با تکنیک وسترن بلاتینگ و استفاده از آنتی‌بادی‌های اختصاصی، تائید شد. نتیجه گیری: پروتئین نوترکیب lipl32 با موفقیت در سیستم پروکاریوتی بیان گردید. این پروتئین را می‌توان در جهت طراحی روش‌های تشخیصی در عفونت‌های ناشی از لپتوسپیرا در دام یا انسان مورد استفاده قرار داد.
|
|
کلیدواژه
|
لپتوسپیروزیس، پروتئین نوترکیب، آنتی‌ژن LipL32 ، کلونینگ، بیان پروتئین
|
|
آدرس
|
دانشگاه پیام نور, گروه زیست شناسی, ایران, دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج, گروه میکروب شناسی, ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Authors
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|