بررسی مولکولی پلی مورفیسم ژنومی ampc شیگلا سونئی جداشده از نمونه‌های بالینی به روش pcr-rflp

زمینه و هدف: شیگلا (shigella) باسیل گرم منفی روده‌ای است که عفونت‌های ناشی از آن مشکلات جدی را در کشورهای پیشرفته و درحال‌توسعه ایجاد کرده است. وجود ژن‌های بتالاکتامازی مانند ampc در گونه‌های شیگلا در یک کشور باعث بروز الگوهای متنوع مقاومت به آنتی‌بیوتیک شده است که شیوع این ژن‌ها می‌تواند خطرات بسیار جدی برای سلامت جامعه داشته باشد. هدف از این مطالعه بررسی شیوع ژن بتالاکتاماز ampc در سویه‌های شیگلا سونئی و همچنین بررسی شیوع یک جهش نقطه‌ای در این ژن به روش rflp بود.مواد و روش‌ها: ابتدا 60 سویه شیگلا سونئی با استفاده از تست‌های بیوشیمیایی و میکروبی شناسایی شد، سپس با روش pcr تکثیر ژن ampc در سویه ها انجام گردید. در ادامه بررسی جهش نقطه‌ای در این ژن بر روی نمونه‌هایی که ازنظر ژن ampc مثبت بودند صورت گرفت. تکنیک rflp با استفاده از آنزیم hinf1 انجام شد.نتایج: از 60 سویه جداشده 30 سویه (50 درصد) دارای ژن بتالاکتاماز ampc بودند. از این تعداد 37 درصد از ژن‌های ampc دارای جهش نقطه‌ای (g به a) بودند.نتیجه‌گیری: نتایج حاصل از این مطالعات نشان‌دهنده افزایش شیوع ژن ampc و شیوع قابل‌توجهی جهش نقطه‌ای (g به a) در این در سویه‌های حامل این ژن بود که این موتاسیون ممکن است در افزایش مقاومت آنتی‌بیوتیکی نقش داشته باشد.

IMolecular Analysis of AmpC Genomic Polymorphism in Shigella Sonnei Isolated from CLinical Specimens by PCR-RFLP Method

Background Objective: Shigella is a gramnegative bacillus that has caused serious infection problems in developed and developing countries. The existence of betalactamase genes such as AmpC in Shigella species in one country has led to a variety of antibiotic resistance patterns, which can have very serious health risks for the community. The aim of this study was to investigate the prevalence of AmpC beta;lactamase gene in S. sonnei strains and determine the prevalence of a spot mutation in this gene by RFLP method.Materials methods: Sixty strains of S. sonei were detected using biochemical and microbiological tests. Subsequently, the amplification of ampC gene was performed by PCR method. Then, a point mutation analysis on this gene was performed on ampC gene positive strains. RFLP technique was performed using Hinf1 enzyme.Results: Among 60 isolates, 30 (50%) isolates were positive for ampC betalactamase gene. Furthermore, A to G point mutation was detected in 11 (37%) ampC gene carrying isolates.Conclusion: The results of this study showed an increasing rate in the prevalence of ampC gene and noticeable prevalence of A to G point mutation in the strains carrying this gene. This mutation may help increase resistance to cephalosporins.