|
|
|
|
کلون کردن اپی توپ های خطی تحریک کننده ی لنفوسیت t آنتی ژن eg95 اکینوکوکوس گرانولوزوس در وکتور pgex4t1 و بررسی بیان آن با روش sds-page
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
مصری رقیه ,اسمعیلی زاد مجید ,احمدزاده مژگان ,محمدی سمیه ,انگجی عبدالحمید ,یزدان پور زهرا ,میر حقگوی جلالی فهیمه
|
|
منبع
|
journal of advanced biomedical sciences - 1395 - دوره : 6 - شماره : 3 - صفحه:311 -318
|
|
چکیده
|
زمینه و هدف: انگل اکینوکوکوس گرانولوزوس عامل بیماری مشترک بین انسان و دام به نام کیست هیداتیک یا هیداتیدوزیس است؛ موفق ترین واکسن نوترکیب علیه این بیماری از کلون کردن ژن کد کننده آنتی ژن 25 کیلو دالتونی آن یعنی eg95 در وکتور pgex می باشد که ایمنی سلولی و همورال قابل توجهی را در گوسفندان ایجاد کرده است اما با توجه به نقش ایمنی سلولی th1 در غلبه بر این بیماری و نقش اپی توپ های خطی در تحریک این نوع سیستم ایمنی جهت بهینه سازی شرایط واکسن موجود در مطالعه حاضر تنها توالی کد کننده اپی توپ های خطی تحریک کننده لنفوسیت t این آنتی ژن کلون و بیان شد.مواد و روش ها: با استفاده از نرم افزار iedb توالی کد کننده ی اپی توپ های خطی آنتی ژن eg95 پیش بینی و سنتز شد. تکثیر قطعه موردنظر با pcr انجام و بعد از هضم آنزیمی آن و وکتور pgex4t1 با آنزیم xhoi، در وکتور با روش شوک حرارتی کلون گردید. کلونی های مثبت با روش colony pcr با استفاده از پرایمرهای مختلف انتخاب شده و بیان پروتئین نوترکیب در سلول bl21 با 10%sds-page موردبررسی قرار گرفت.نتایج: تکثیر توالی کد کننده اپی توپ های eg95 با pcr انجام و قطعه موردنظر در وکتور pgex4t1 کلون گردید. تایید پلاسمید نوترکیب با colony pcr و اختلاف اندازه وکتور طبیعی و نوترکیب صورت گرفت. بیان پروتئین نوترکیب آنتی ژن نیز به وضوح با sds-page مشخص شد.نتیجه گیری: قطعه eg95 به طور موفقیت آمیزی در وکتور pgex4t1 کلون و در سلول bl21 بیان شد.
|
|
کلیدواژه
|
واکسن های اپی توپی، لنفوسیت t، آنتی ژن eg95، کیست هیداتیک
|
|
آدرس
|
دانشگاه خوارزمی, دانشکده علوم زیستی, گروه آموزشی سلولی و مولکولی, ایران, موسسه تحقیقاتی واکسن و سرم‌سازی رازی, بخش آزمایشگاه مرکزی, ایران, دانشگاه خوارزمی, دانشکده علوم زیستی, گروه آموزشی سلولی و مولکولی, ایران, دانشگاه خوارزمی, دانشکده علوم زیستی, گروه آموزشی سلولی و مولکولی, ایران, دانشگاه خوارزمی, دانشکده علوم زیستی, گروه آموزشی سلولی و مولکولی, ایران, موسسه تحقیقاتی واکسن و سرم‌سازی رازی, بخش آزمایشگاه مرکزی, ایران, موسسه تحقیقاتی واکسن و سرم‌سازی رازی, بخش آزمایشگاه مرکزی, ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Cloning of linear T-cell epitops of EG95 antigen of Echinococcus granulosus into pGEX4t1 vector and expression analysis by SDS-PAGE
|
|
|
|
|
Authors
|
Mesri Roghayeh ,Esmaelizad Majid ,Ahmadzadeh Mmozhghan ,Mohammadi Somayeh ,Angaji Seyed Abdolhamid ,Yazdanpour Zahra ,Mmir Haghghouy Jali Seyedeh Fahimeh
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|