بهینه‌سازی کدون ژن فاکتور سلول‌های بنیادی (scf) و ارزیابی بیان این ژن با کمک وکتور pbudce4.1 در سلول‌های تخمدان همستر چینی (cho)

زمینه و هدف: فاکتور سلول بنیادی (scf) یک سایتوکاین خونی است که می تواند از طریق تاثیر بر روی سلول های مولد خون ساز در تمایز سلول های پیش ساز خونی، بقاء، تکثیر و تمایز ماست سل ها و همچنین افزایش تکثیر و تهاجم سلول های توموری بااهمیت باشد و نقش درمانی آن در بهبود بیماری هایی نظیر آلزایمر و سکته های قلبی در حال بررسی و تحقیق است. هدف از این تحقیق کلون سازی ژن scf به وسیله حامل بیانی pbudce4.1 با بهینه سازی کدون در سلول های تخمدان همستر چینی (cho) بود.مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی توالی scf بعد از بهینه سازی کدون برای سلول های cho و تغییر دادن محتوی g+c به میزان بهینه به صورت سنتتیک ساخته شد و در وکتور بیانی pbudce4.1 ساب کلون شد. سپس ژن scf به همراه پلاسمید موردنظر به درون سلول های chok1 ترانسفکت شد و با استفاده از rt qpcr میزان بیان ارزیابی گردید.نتایج: حامل بیانی نوترکیب pbudce4.1/scf ساخته شد و با تکنیک pcr، هضم آنزیمی و تعیین توالی مورد تائید قرار گرفت. نتایج rt qpcr نشان داد که ژن scf پس از بهینه سازی کدون در سلول های cho می تواند بیان شود. نتیجه گیری: نتایج نشان داد که به خوبی می توان نسبت به همسانه سازی ژن scf از طریق حامل بیانی pbudce4.1 اقدام کرد و این حامل بیانی می تواند یک حامل مناسب برای بیان ژن scf در سلول های cho باشد.