بررسی افزایش بیان ژنbnful در گیاهان تراریخته کلزا

کلزا یکی از گیاهان مهم روغنی است که در سال های اخیر کشت آن در ایران توسعه زیادی پیدا کرده است. یکی از مشکلات کلزا ریزش دانه قبل و در حین برداشت است که بسته به شرایط آب و هوایی می تواند تا 50 درصد باعث کاهش محصول شود. تولید گیاهان متحمل به ریزش دانه می تواند موجب افزایش عملکرد شود. عوامل ژنتیک و محیطی متعددی بر روی این صفت اثر دارند. از جمله عوامل ژنتیک وجود ژن ful در این گیاهان است که افزایش بیان آن می تواند مانع از باز شدن غلاف و ریزش دانه شود. ژن ful که از کلزا رقم quantum جداسازی و به سه رقم مختلف گیاهان تراریخته کلز ا انتقال داده شده بود در این پژوهش استفاده شد. بررسی های مولکولی روی گیاهان تراریخته در نسل t2 با استفاده از آزمون های پی سی آر، لکه گذاری سادرن و real time-pcr انجام گرفت. آزمون پی سی آر نشان داد که علاوه بر ژن داخلی گیاه، تراژن bnful نیز در گیاهان تراریخته وجود دارد. آزمون لکه گذاری سادرن نشا ن داد که در گیاهان تراریخته حداقل یک نسخه از تراژن وجود دارد . آزمونreal time-pcr نشان داد که بیان ژن bnful در گیاهان تراریخته در مقایسه با گیاهان شاهد افزایش یافته است. همچنین سطح بیان این ژن د ر لاین های مختلف نیز اختلاف نشان دادند. بخشی از این تفاوت در بیان می تواند ناشی از تعداد نسخه های مختلف تراژن و یا اثرهای محل ورود تراژن در ژنوم باشد.

Study of overexprexpression of the BnFUL gene in transgenic oilseed rape

Oilseed rape is one of the important oil plants that its cultivation has been expanded in Iran in recent years. Seed shattering before and during harvesting is a problem of cultivation of this plant can causes up to 50% yield decrease depending on the environmental conditions. Production of seed shatter tolerant plants can increase the yield. Different genetic and environmental factors can affect this trait. The FUL gene is one of the genetic factors in that its over expression could prevent silique opening and seed shattering. Rapeseed transgenic plants of three cultivars containing the BnFUL gene were produced and molecular studies were carried out on T2 generations transgenic plants using PCR, Southern blotting and real time PCR. PCR showed that the BnFUL transgene has been inserted in the transgenic plants in addition to the internal gene. The copy number of transgene in transgenic and control plants were analyzed by Southern blotting which confirmed presence of at least one intact copy of the transgene in transgenic plants. Real time PCR showed that BnFUL gene expression in transgenic plants in comparison with control plants has been increased. Differences between the expression of transgenic plants in different lines could be because of position effect and copy number.