ردیابی مولکولی جدایه‌های بومی باکتری bacillus thuringiensis از خاک‌های دارای پوشش‌گیاهی مختلف

سویه های بومی باکتری (bt) bacillus thuringiensis از خاک اکوسیستم های مختلف شهرستان های استان مازندران جداسازی و ژن cry1 عامل تولید پروتئین موثر بر روی حشره ها، در آن ها ردیابی شد. از 128 نمونه خاک مورد بررسی، تعداد 491 سویه باسیلی شکل به کمک بازدارندگی انتخابی استات سدیم جداسازی شد. با استفاده از فاز کنتراست میکروسکوپ نوری، 293 باکتری تولیدکننده اسپور، 85 باکتری تولیدکننده اسپور و cap و 113 باکتری تولیدکننده اسپور، cap و کریستال شناسایی شدند که به ترتیب 67/59، 31/17 و 01/23 درصد از کل سویه های جداسازی شده را تشکیل می دادند. بررسی مولکولی ژن cry1 و 14 زیر گروه ژنی آن با استفاده از 14 جفت آغازگر اختصاصی انجام شد. در 15 جدایه ژن cry1 در اندازه مورد انتظار شناسایی شد. در بررسی تعیین زیرگروه های ژنی، ژن های cry1ac و cry1i در تمامی سویه ها یافت شدند اما ژن های cry1aa، cry1f، cry1g و cry1k در هیچ یک از سویه ها مشاهده نشدند. در برخی از سویه ها ژن های cry1d، cry1e و cry1j در اندازه های متفاوت از آنچه مورد انتظار بود، تکثیر شدند. این سویه ها ممکن است محتوی یک ژن و یا ژن های جدیدی باشند. یافتن سویه های بومی با ژن های موثر در مناطق مختلف و کاربرد آن در مهندسی ژنتیک می تواند در مدیریت حشره های آفت در آینده مفید واقع شود.

Molecular detection of native isolates of Bacillus thuringiensis from soils samples with different vegetations

native isolates of Bacillus thuringiensis were obtained from soil samples of various ecosystems in Mazandaran province and Cry1, the insecticidal proteinencoding gene, was detected in the isolates. About 491 bacilliform isolates were obtained from 128 soil samples through sodium acetate inhibition procedure. Two hundred ninety one sporeforming, 85 spore and capforming and 113 spore, cap and crystal forming bacteria representing 59.67, 17.31 and 23.01% 0f the isolated strains were identified by phase contrast microscopy. Molecular identification of Cry1 and its 14 related genes were carried out by 14 pairs of genespecific primers. Fifteen isolates contained the Cry1 gene in the expected size. Cry1Ac and Cry1I were detected in all of the isolates but Cry1Aa, Cry1F, Cry1G and Cry1K were not entirely found. Cry1D, Cry1E and Cry1J were amplified in some of the isolates in different sizes: this could be attributed to the fact that they might have contained one or more new Cry genes. Detecting the effective genes of native Bt strains and their application in genetic engineering can be a useful component in future of insect pest management system.