انتقال و بیان ژن انسولین نوترکیب منومر در گیاه آرابیدوپسیس

گسترش دیابت در جهان با افزایش قابل توجه ای در دهه های آینده پیش بینی شده است. میزان شیوع این بیماری در کشور ایران نیز هر ساله در حال افزایش است و جان هزاران نفر بیمار را تهدید می کند. پروتئین دارویی آسپارت یکی از آنالوگ های دارویی اصلی برای درمان دیابت است که نسبت به انسولین لیسپرو زمان اوج سریع تری دارد و می توان از آن در پمپ های انسولین، خودکار انسولین و در روش تزریق استفاده کرد. در این تحقیق ژن آسپارت بعنوان تراژن استفاده شد و همچنین برای تراریخت کردن گیاه آرابیدوپسیس تالیانا از دو نژاد اگروباکتریوم eha101 و gv3101 که حاوی پلاسمید دوگانه pjawohl3 حامل ژن انسولین مونومر آسپارت بود، استفاده شد. در این تحقیق گیاهان در مرحله گلدهی توسط اگروباکتریوم با روش غوطه ورسازی گل آذین تیمار شدند. صحت حضور ژن انسولین مونومر آسپارت و بیان آن با استفاده از تکنیک استخراج dna، واکنش زنجیره ای پلیمراز و وسترن بلات مورد تایید قرار گرفت. نتایج حاصل از تراریخت شدن گیاه آرابیدوپسیس با پلاسمید pjawohl3 حاوی ژن انسولین آسپارت نشان داد که آگروباکتری سویه eha 101 کارایی بالاتری در انتقال ژن دارد.

Transformation and expression of recombinant insulin monomer in Arabidopsis plant

the prevalence of diabetes is predicted to rise significantly in the coming decades. Also, the incidence of this disease is increasing in Iran every year. Aspart is an insulin analog. Aspart insulin has a more rapid peak than Lispro and can be used in insulin pumps, insulin pens and injection methods. In this research, Two Agrobacterium tumefaciens strains, EHA101 and GV 3101, containing pJawohl3 carrying the Aspart insulin gene were used to transform Arabidopsis thaliana Col0 ecotype plants by floral dip infiltration method. Seeds of floral dip infiltrated plants were sown on the pots. Then, seedlings were treated by BASTA herbicide. Expression of the Aspart insulin gene was detected in transgenic plants by RTPCR and western blot. Evaluation of the infiltrated plants revealed that the EHA101 strain of Agrobacterium was more efficient than GV3101 strain in gene transformation.