تراریختی گوجه فرنگی با ژن پیروفسفاتاز واکوئلی (avp1) در جهت افزایش تحمل آن به شوری

امروزه مهندسی ژنتیک به یکی از ابزار امیدوار کننده برای تولید گیاهان تراریخته مقاوم به تنش های زیستی از جمله تنش شوری تبدیل شده است. هدف از این تحقیق، انتقال ژن پیروفسفاتاز واکوئلی آرابیدوبسیس به گیاه گوجه فرنگی با استفاده از آگروباکتریوم بود. وکتور نوترکیب ppzp حامل ژن avp1 ابتدا به باکتری اکولای جهت تکثیر و  سپس به باکتری آگروباکتریوم  جهت تاریختی گیاه گوجه فرنگی انتقال یافت. ریزنمونه های کوتیلدون و هیپوکوتیل تلقیح یافته با آگروباکتریوم حاوی وکتور نوترکیب پس از هم کشتی  با آگروباکتریوم جهت باززایی در محیط کشت تکمیل شده با  سه غلظت مختلف bap کشت شدند . بین ریزنمونه و تنظیم کننده رشد گیاهی bap اثر متقابل معنی داری در باززایی نوساقه های تراریخته مشاهده نشد، ولی اثر میزان bap و نوع ریزنمونه در ترایختی گیاه معنی دار بود. مقایسه میانگین با  آزمون دانکن در سطح احتمال 5درصد نشان داد که از محیط تکمیل شده با 2 میلی گرم در لیتر bap گیاهان تراریخت بیشتری باززا شدند. همچنین درصد باززایی ریزنمونه های کوتیلدون نسبت به هیپوکوتیل بهتر بود.  به منظور بررسی مولکولی گیاهچه های احتمالا تراریخت، استخراج dna از نمونه ها انجام و سپس با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ژن avp1، pcr صورت گرفت. نتایج حاصل وجود محصول واکنش با طول 440 جفت باز ژن avp1 را نشان داد. در مرحله بعد گیاهان تراریخت جهت تولید بذر به گلخانه منتقل شدند.

transformation of tomato with vacuolar pyrophosphatase gene (avp1) to enhance salt tolerance

genetic engineering becomes a hopeful tool to develop stress tolerance transgenic plants including salt tolerance transgenic plants. the subject of this study was the transformation of tomato with a vascular antiporter gene using agrobacterium. the pbzp plasmid harboring avp1 gene was transferred to e.coli for amplification and then transferred to agrobacterium for tomato transformation. cotyledon and hypocotyl explants inoculated with recombinant agrobacterium transferred to ms medium supplemented with three concentrations of bap for plant regeneration. analysis of variance showed there was no interaction between bap and explant type in regeneration capacity but both explant and bap concentration in medium had significant effect on transformation efficiency. mean compression using duncan multiple rang test at 5 percent level showed that highest regeneration of transgenic plants achieved in ms medium supplemented with 2 mg/l bap. regeneration efficiency from cotyledon explant was more than cotyledonary explants. genomic dna of putative transgenic plants extracted and analyzed by pcr for presence of transgene using avp1 gene specific primers. the results showed 440 bp of avp1 amplicon in transgenic plants. the transgenic plants transferred to greenhouse for next investigations.