جداسازی و تعیین خصوصیات باکتریوفاژهای آلوده کننده seudomonas syringae pv. syringae و ارزیابی کارایی کنترل بیولوژیکی آنها

شانکر باکتریایی یکی از خسارت زاترین بیماری‏ها روی درختان میوه هسته دار است. این بیماری توسط یک باکتری گرم‏ منفی به نام pseudomonas syringae pv. syringae ایجاد می شود. استفاده مکرر از آنتی بیوتیک ها و ترکیبات مسی باعث ظهور نژادهای جدید و بروز پدیده مقاومت شده است. یکی از امیدوارترین ترکیبات جایگزین استفاده از باکتریوفاژها است . در این پژوهش 56 نمونه خاک از اطراف درختان میوه هسته دار مشکوک به شانکر باکتریایی از شمال‏غرب ایران جمع ‏آوری شد. جهت بررسی حضور ذرات فاژی در داخل نمونه‏ ها، از روش نقطه ای استفاده شد. از روش آگار دولایه-آگار نرم  برای خالص ‏سازی و تهیه پلاک های  منفرد فاژی استفاده شد. مجموعاً 75 جدایه فاژی که همگی دارای پلاک شفاف بودند از نمونه ها جداسازی شد که از این تعداد، پنج فاژ که بیشترین قدرت لیزکنندگی را داشتند، برای بررسی با میکروسکوپ الکترونی و مطالعات گلخانه‏ ای انتخاب شدند. از فاژهای منتخب، پنج فاژ شباهت ریخت‏ شناسی به فاژهای خانواده myoviridae، tectividae و microviridae از خود نشان دادند. هرچند هر پنج فاژ در کاهش رشد جمعیت باکتریایی در محیط کشت مایع موثر بودند اما کوکتل تهیه شده از مخلوط پنج فاژ اثر به مراتب شدیدتری از فاژهای انفرادی از خود نشان داد. نتایج آزمایشات گلخانه ای نشان داد که این فاژها به طور موثر باعث کاهش توسعه بیمارگر در داخل گیاه شده و تا 90 درصد می‏توانند علایم ناشی از باکتری را در گیاه کاهش دهند. پنج فاژ منتخب در این تحقیق در آزمایشگاه و در گلخانه نتیجه قابل‏ قبولی در کنترل عامل شانکر باکتریایی درختان میوه ‏هسته‏ دار از خود نشان دادند و فرمولاسیون آن‏ها در سطح منطقه قابل توصیه می‏باشد.

isolation and characterization of bacteriophages infecting pseudomonas syringae pv. syringae, and evaluating their biological control efficiency

bacterial canker is one of the most devastating diseases on the stone fruit trees. this disease is caused by a gram-negative bacterium called pseudomonas syringae pv. syringae. consecutive use of antibiotics and copper compounds has caused the emergence of new resistance races. one of the most promising replacement compounds is the use of bacteriophages. in this research, 56 soil samples were collected from the suspected trees of having bacterial canker from northwestern of iran. in order to check the presence of phage particles, double-layer soft-agar technique was used to purify individual phage plaques. a total of 75 phage isolates, all of which had clear plaques, were isolated from the samples, among them, five phages with the highest lysing capability were selected for electron microscopy and greenhouse studies. among the selected phages, three phages showed morphological similarity to myoviridae, tectividae and microviridae families. although all five phages were effective in reducing the growth of bacterial population in liquid culture medium, significant differences were observed between them. the cocktail prepared from the mixture of five phages showed a much stronger effect than the individual phages. the results of the greenhouse tests showed that these phages effectively reduce the development of the pathogen inside the bean and can reduce the bacterial symptoms in the treated plant by 90%. the five isolated phages in this research showed acceptable results in the control of the agent of bacterial canker of the stone fruit trees in the laboratory and in greenhouse experiments, and their actual formulation is recommended at the regional level.