بررسی انتقال و بیان ژن rt1 چای ترش در گندم

پپتیدهای ضد میکروبی در برابر پاتوژن های گیاهی فعالیت های ضد میکروبی قوی نشان می دهند و جایگزین های خوبی برای سموم متداول هستند. در این مطالعه برای انتقال ژن پپتید ضد میکروبی rt1 گیاه چای ترش به گندم از سویه lba4404 اگروباکتریوم حامل پلاسمید نوترکیب pbi121-rt1 استفاده شد. ریزنمونه های جنین بالغ چهار رقم گندم (سایسون، بهار، چمران و آرتا) پس از هم کشتی با سوسپانسیون باکتری به محیط گزینشی کالوس دهی حاوی دو میلی گرم در لیتر 2,4-d و دو میلی گرم در لیتر picloram به همراه 50 میلی گرم در لیتر آنتی بیوتیک کانامایسین و 500 میلی گرم در لیتر سفوتاکسیم منتقل شدند. کالوس های جنین زا پس از رشد در محیط گزینشی، انتخاب و بعد به محیط باززایی حاوی 25 میلی گرم در لیتر کانامایسین و 250 میلی گرم در لیتر سفوتاکسیم انتقال یافتند. حضور و بیان ژن rt1 در سطح رونویسی در گیاهان تراریخت به کمک آغازگرهای اختصاصی به ترتیب با استفاده از روش های pcr و rt-pcr تایید شد. براساس نتایج از بین 15 گیاه تراریخت احتمالی فقط 11 گیاه تراریخت بودند. از بین 11 گیاه تراریخت، پنج گیاه مربوط به رقم سایسون با درصد تراریختی 1.6، چهار گیاه مربوط به رقم بهار با درصد تراریختی 1.3 و دو گیاه مربوط به رقم چمران با درصد تراریختی 0.6 بودند. از رقم آرتا هیچ گیاه تراریختی بدست نیامد.

investigation of transformation and expression of roseltide rt1 gene in wheat

antimicrobial peptides display powerful antimicrobial activities against a large set of plant pathogens and are a good alternative to conventional toxins. to transfer rt1 gene of hibiscus sabdariffa to wheat, agrobacterium tumefaciens strain lba4404 harboring the pbi121-rt1 plasmid was used. mature embryo explants of four wheat cultivars including the saison, bahar, chamran and arta after co-cultivated with a. tumefaciens suspension were transferred to a selective callus medium containing 2 mg/l 2,4-d, 2 mg/l picloram, 50 mg/l kanamycin and 500 mg/l cefotaxime. embryogenic calli were selected after growth in a selective medium and then transferred to a regenerative medium containing 25 mg/l kanamycin and 250 mg/l cefotaxime. the presence and expression of rt1 gene at the transcriptional level in transgenic plants were confirmed by pcr and rt-pcr methods respectively using specific primers. based on the rt-pcr results, the rt1 gene was expressed in transgenic wheat plants. in this study, out of 15 possible transgenic plants, only 11 were transgenic. among transgenic plants, five plants belonged to saison cultivar with 1.6 transgenic percentage, four plants represented to the bahar cultivar with 1.3 transgenic percentage and two plants belonged to the chamran cultivar with 0.6 transgenic percentage. no transgenic plant was obtained for the arta cultivar.