تاثیر غلظت‌های مختلف عناصر غذایی محیط ‌کشت بر بهینه‌سازی القای ریشه‌های مویین خرفه

القای ریشه‌های مویین به‌وسیله‌ agrobacterium rhizogenes روش موثری برای افزایش ترکیبات دارویی گیاه خرفه است. ریشه‌های مویین علاوه بر میزان رشد زیاد، از پایداری ژنتیکی و بیوشیمیایی برخوردارند. خرفه (.portulaca oleracea l) یکی از گیاهان دارویی ارزشمند می‌باشد و دارای متابولیت‌های ثانویه‌ ارزشمندی از جمله دوپامین و نورآدرنالین است. در این پژوهش ریشه‌های مویین خرفه با استفاده از arobacterium rhizogenes سویه‌ی a4 القا شد. همچنین تاثیر غلظت‌های مختلف عناصر غذایی ماکرو محیط ‌کشت (x0.5، x1، x1.5، x2 و x2.5 برابر غلظت عناصر در محیط ‌کشت ms پایه) بر درصد القای ریشه‌های مویین و میزان فنول و فلاونوئید کل در ریشه‌ها بررسی شد. به‌منظور تائید تراریختی ریشه‌های مویین، وجود ژن rolb در ریشه‌های مویین، از روش pcr و پرایمرهای ژن rolb استفاده شد. نتایج به‌دست آمده نشان داد که بیشترین درصد القای ریشه‌های مویین در غلظت x0.5 پتاسیم نیترات (80درصد) مشاهده شد. غلظت x0.5 پتاسیم نیترات بیشترین میزان فنول کل (4.52 میلی‌گرم بر گرم وزن خشک) را داشت. بیشترین میزان فلاونوئید کل (18.2 و 17.02 میلی‌گرم بر گرم وزن خشک) به‌ترتیب مربوط غلظت x0.5 و x1 پتاسیم نیترات بود. تائید مولکولی ریشه‌های مویین تراریخته توسط واکنش pcr انجام شد.

Effect of different concentrations of medium nutrients on optimization of hairy root induction in Purslane

Hairy root induction by Agrobacterium rhizogenes is a reliable method to increase P. oleracea medicinal compounds. The hairy roots in addition to high growth rates are genetically and biochemically stable. Purslane (Portulaca oleracea L.) is one of the valuable medicinal plants and has important secondary metabolites such as dopamine and noradrenaline. In this study, hairy roots of Purslane were produced by using Agrobacterium rhizogenes strain A4 and different concentrations of macro elements (0.5x, 1x, 1.5x, 2x and 2.5x concentrations of MS base medium) were investigated. For confirming hairy roots transformation, the presence of the rolB gene in the hairy roots was performed by PCR and using rolB gene #39;s specific primers. The results show that maximum hairy root induction was observed by using 0.5x KNO3 (80 percentage). The highest phenolic content was obtained by using 0.5x KNO3 (4.52 mg/g DW) and also maximum flavonoid content, (18.2 and 17.02 mg/g DW respectively) was belonged to 0.5x and 1x KNO3. Molecular confirmation of transgenic hairy roots was done with PCR reaction.