افزایش هضم پذیری شیر در اثر پیش تیمار بتا لاکتوگلوبولین شیر با شکل نوترکیب سیستم تیوردوکسین/ گلوتاتیون گیاهی

بتالاکتوگلوبولین (blg) یکی از بزرگترین آلرژن های شیر گاو است که باعث هضم کم شیر می شود. وجود دو پیوند دی سولفیدی هضم این پروتئین را کاهش داده است. به نظر می رسد استفاده از احیا کننده هایی که بتوانند باندهای دی سولفیدی موجود در این پروتئین را احیاء کنند، هضم پذیری این پروتئین را افزایش می دهند. بدین منظور در این مطالعه از سیستم گلوتاتیون/ تیوردوکسین گیاهی برای افزایش هضم پذیریblg استفاده شد. تیوردوکسین ها (trxs)، دی سولفیدردوکتازهای هستند که در تنظیم اکسیداسیون/ احیاء سلولی دخالت دارند که خود توسط گلوتاتیون (gsh) احیاء می شوند. در این مطالعه با در دست داشتن باکتری تراریخته مقدار قابل توجهی از این پروتئین ها تولید و خالص سازی شد. برای احیاء blg از سیستم نوترکیب تیوردوکسین/ گلوتاتیون گیاه برنج به نام سیستم gsh/ostrx20 استفاده شد. بدین منظور blg ابتدا با اجزای این سیستم همراه با gsh در دماهای مختلف 4، 25 و37 درجه سانتیگراد پیش تیمار شد. سپس blg با تریپسین مورد هضم آنزیمی قرار گرفت. میزان هضم پذیری blg با استفاده از ژل sds-page و rp-hplc بررسی شد. نتایج نشان داد که پیش تیمار blg با استفاده از سیستم gsh/ostrx20 به طور قابل توجهی بر هضم پذیری آن با آنزیم تریپسین موثر بوده است.

Increased digestibility of milk beta-lactoglobulin by treatment with a plant recombinant glutathione/ thioredoxin system

Beta;lactoglobulin (BLG) is one of the main allergens in cow rsquo;s milk that causes it to be digested poorly. BLG structure has two intramolecular disulfide bonds and one free cysteine in cys121 that disulfide bonds are responsible for its low digestibility. It seems that the digestibility of BLG will be increased via the reduction of disulfide bonds. In the present work, the aim was to study the effect of plant glutathione/thioredoxin systems on the digestibility of milk BLG. Thioredoxins (Trxs) are small and abundant disulfide reductase in all organisms. they are reduced with Trx reductase or glutathione reductase or glutathione. Previously the genes encoding plant Trx, OsTrx20 was cloned and heterologously expressed in E.coli. In this work this protein was produced and purified in considerable amounts. The interaction of Trx with glutathione (GSH) was confirmed by insulin assay. The result of this assay showed that GSH was able to reduce OsTrx20. Therefore, in this work the effect of GSH/OsTrx20 on the digestibility of BLG was studied. Finally, BLG was pretreated by GSH/OsTrx20 at 4, 25 and 37 °C and then digested with trypsin. The digestibility was studied by using SDSPAGE and HPLC and allergenicity was studied by ELISA. The results revealed that the GSH/Trx system significantly affects on the BLG digestibility and allergenicity.