|
|
مقایسه بیان ژن نوکلئوکپسید ویروس پژمردگی لکه ای گوجه فرنگی در دو سویه باکتری e. coli
|
|
|
|
|
نویسنده
|
زائر زهرا ,کولیوند داود ,عینی امید
|
منبع
|
مهندسي ژنتيك و ايمني زيستي - 1397 - دوره : 7 - شماره : 1 - صفحه:91 -102
|
چکیده
|
از آنجایی که روش های تولید آنتی بادی برای کاربرد در ویروس ها دارای محدودیت هایی می باشد، بیان پروتئین پوششی در سیستم پروکاریوتی به منظور تولید آنتی ژن انجام می شود. در پژوهش حاضر ژن نوکلئوکپسید ویروس پژمردگی لکه ای گوجه فرنگی از یک جدایه بومی در ایران تکثیر شده و پس از همسانه سازی، قطعه مربوط به ژن نوکلئوکپسید در سازه ptg19tswvn با آنزیم های bamhi و xhoi خارج شد و در حامل بیانی pet32a(+) برش یافته با آنزیم های bamhi وxhoi همسانه سازی شد. سپس، سازه pet32tswvn به سویه های bl21(de3) و bl21(de3) plyss از باکتری e. coli انتقال یافت. بیان ژن نوکلئوکپسید با استفاده از القای پیشبر با غلظت یک میلی مولار iptg در هر دو سویه صورت گرفت. چهار ساعت پس از القا، محیط های کشت باکتریایی جمع آوری شدند و محتوای پروتئینی استخراج شده از دو سویه مذکور در الکتروفورز عمودی بررسی شدند. با توجه به وزن مولکولی پروتئین بیان شده به همراه برچسب هایی که از پلاسمید به پروتئین اضافه شده بود، پروتئینی به اندازه حدود 48 کیلودالتون در الکتروفورز عمودی مشاهده شد. نتایج این تحقیق حاکی از بیان ژن نوکلئوکپسید در دو سویه مذکور بود در حالیکه بیان پروتئین در سویه باکتریایی bl21(de3) plyss نسبت به bl21(de3) بیشتر بود.
|
کلیدواژه
|
بیان، سیستم پروکاریوتی، پروتئین نوترکیب، ویروس پژمردگی لکهای گوجهفرنگی
|
آدرس
|
دانشگاه زنجان, دانشکده کشاورزی, گروه گیاهپزشکی, ایران, دانشگاه زنجان, دانشکده کشاورزی, گروه گیاهپزشکی, ایران, دانشگاه زنجان, دانشکده کشاورزی, گروه گیاهپزشکی, ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Comparison of Tomato spotted wilt virus nucleocapsid gene expression in two different strains of E. coli
|
|
|
Authors
|
Zaer Zahra ,Koolivand Davoud ,Eini Omid
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|