بررسی اثر داروهای اگزالی‌پلاتین و پاکلی تاکسل برسلول‌های سرطان کولون (ht29) و آنالیز بیان ژن‌های آپوپتوزی کاسپاز3، کاسپاز9 وp53

هدف بررسی اثرات سمیت سلولی پاکلی‌تاکسل و اگزالی‌پلاتین بر رده سلولی سرطان کولون (ht29) و آنالیز بیان ژن‌های آپوپتوزی کاسپاز 3، 9و p53 می‌باشد. مواد و روش ها: ابتدا سمیت سلولی داروهای پاکلی‌تاکسل و اگزالی پلاتین و اثر توام آنها با غلظت‌های مختلف بر رده سلولی ht29 با روش mtt بررسی شد و غلظت 50 درصد کشندگی (ic50) آن تعیین شد. میزان بیان ژن‫های آپوپتوزی کاسپاز 3 و 9 نسبت به ژن مرجع gapdh با استفاده از روش real-time pcr بررسی شد. هم چنین بررسی آپوپتوز سلول ها با استفاده از رنگ آمیزی annexin v/pi و dapi انجام شد. ‬‬‬نتایج :پاکلی‌تاکسل و اگزالی‌پلاتین به ترتیب در غلظت های 3.25 و 0.00062 میکروگرم در میلی‫لیتر بیشترین اثر سمیت سلولی را دارد و میزان ic50 آن 0.00016 و µg/ml 12.5 محاسبه شد. تیمار همزمان داروها زنده‌مانی سلول‌ها را کاهش داد . بیان ژن‫های کاسپاز 3 و 9, p53 نسبت به ژن مرجع gapdh در سلول های سرطان کولون تیمار شده نیز افزایش یافت. نتایج آزمون dapi نشان دهنده ی قطعه قطعه شدن هسته‌ها و آپوپتوز در گروههای تیماری همزمان بود.‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬ بررسی آپوپتوز با استفاده از annexin v/pi نشان می‌دهد که 98 درصد سلول‌های گروه شاهد سالم می باشند و درصد زیادی از سلول‌ها تحت تیمار دچار آپوپتوز شده اند . ‬‬‬‬‬نتیجه گیری: با‌ توجه به سمیت سلولی و القای فرایند آپوپتوزیس در رده سلولی سرطان کولون توسط داروهای پاکلی‌تاکسل و اگزالی-پلاتین، می‫توان نتیجه‌گیری کرد که این داروها گزینه مناسب جهت درمان سرطان کولون می باشند.‬‬‬‬‬

investigation of effect of oxaliplatin and paclitaxel drugs on colon cancer cells(ht29) and analysis of apoptotic genes expression caspase 3, caspase 9 and p53

aim: in this study the effects of paclitaxel and oxaliplatin on colon cancer cell line (ht29) and expression of apoptotic genes caspase 3, 9, and p53 were examined.material and methods: using the mtt method, the cytotoxicity of paclitaxel and oxaliplatin and synergic effect at different concentrations on the ht29 cell line was assessed. the ic50 of paclitaxel and oxaliplatin was determined.the expression level of caspase 3 and 9 was assessed using the real-time pcr method after the cells had been exposed to the ic50 concentration. apoptosis of the cells was done using annexin v/pi and dapi staining.results: the treatment of cells revealed that paclitaxel and oxaliplatin at concentrations of 3.25 and 0.00062 µg/ml , respectively, have the most cytotoxic effects and its ic50 value was determined to be 12.5 µg/ml and 0.00016 and treatment groups at concentrations of 3.25 and 0.00062 µg/ml , respectively, decreased the cell viability and its ic50 value was determined to be 12.5 µg/ml and0.00016µg/m. the expression level of caspase 3 and 9 p53 was also increased in the treated colon cancer cell line. dapi staining showed apoptosis in the simultaneous treatment groups with. using annexin v/pi reveals that 98 percent of the cells in the control group are healthy and a considerable number of the cells in the treated groups have undergone apoptosis. conclusion: is. it is clear that paclitaxel and oxaliplatin are effective options for treating colon cancer given their cytotoxicity and stimulation of the apoptotic process in colon cancer cell lines.