بررسی شیوع، تنوع ژنتیکی و مقاومت آنتی‌بیوتیکی کلستریدیوم دیفیسیل (کلستریدیوس دیفیسیل) در فرآورده‌های نیمه ‌پخته آماده مصرف در مراکز فروش استان اصفهان

مقدمه: کلستریدیوم دیفیسیل (کلستریدیوس دیفیسیل) یکی از علل اصلی ناشی از کولیت کاذب غشایی و یکی از انتروپاتوژن‎های مهم در انسان شناخته‌ شده است. مصرف آنتی‌بیوتیک، یکی از مهم‌ترین عوامل خطر در شیوع و بروز عفونت بیمارستانی کلستریدیوم دیفیسیل معرفی ‌شده است. هدف از انجام پژوهش حاضر، بررسی شیوع، مقاومت آنتی‌بیوتیکی و تنوع ژنتیکی باکتری کلستریدیوم دیفیسیل در فرآورده‌های نیمه‌ پخته آماده مصرف در مراکز فروش استان اصفهان بود. روش‌ها: 240 نمونه از فرآورده‌های نیمه ‌پخته شامل کوکو سیب‌زمینی، کوکو سبزی، کوردن بلو و ناگت مرغ (از هر کدام 60 نمونه) توزیع شده در سطح استان اصفهان، در فاصله زمانی تیر ماه تا بهمن ماه سال 1400 به صورت تصادفی جمع‌آوری گردید. جهت جداسازی کلستریدیوم دیفیسیل، از محیط کشت کلستریدیوم دیفیسیل موکسالاکتام نورفلوکساسین استفاده شد. ژن‌های مربوط به توکسین‌های کلستریدیوم دیفیسیل با عناوین tcda و tcdb از طریق واکنش زنجیره‌ای پلیمراز چندگانه (multiplex polymerase chain reaction یا m-pcr) شناسایی و حساسیت آنتی‌بیوتیکی این جدایه‌ها بر اساس آزمون حداقل غلظت مهارکنندگی (maximum inhibitory concentration یا mic) تعیین گردید. نتایج شیوع با استفاده از آزمون 2c و سطح معنی‌داری 0.05 > p در نرم‌افزار spss مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. یافته‌ها: 37 نمونه آلوده به کلستریدیوم دیفیسیل بودند. آلودگی به کلستریدیوم دیفیسیل در نمونه‌های نیمه پخته شامل کوکو سیب‌زمینی، کوکو سبزی، کوردن بلو و ناگت مرغ به ترتیب 13.3، 20.0، 11.6 و 16.6 درصد مشاهده شد. بیشترین آلودگی به محصول کوکو سبزی اختصاص داشت. توکسین‌های مسوول تولید سموم شامل 15 نمونه مثبت tcda و 17 نمونه مثبت tcdb شناسایی گردید. در جدایه‌های کلستریدیوم دیفیسیل، بیشترین میزان مقاومت نسبت به آنتی‌بیوتیک‌های آمپی‌سیلین و پنی‌سیلین و بیشترین حساسیت مربوط به کلرامفنیکل و مترونیدازول بود.نتیجه‌گیری: فرآورده‌های نیمه ‌پخته آماده مصرف می‌توانند به عنوان منبع احتمالی کلستریدیوم دیفیسیل مقاوم به آنتی‌بیوتیک در نظر گرفته شوند. بنابراین، پخت کامل غذاهای نیمه ‌آماده قبل از مصرف در دما و زمان مناسب 85 درجه سلسیوس و 30 دقیقه و رعایت بهداشت در مراکز تولید، می‌تواند از بروز عفونت‌های گوارشی احتمالی از طریق سویه‌های کلستریدیوم دیفیسیل در مصرف‌کنندگان جلوگیری نماید.

examination of the prevalence, genetic diversity and antibiotic resistance of clostridium difficile (clostridioides difficile) in semi-cooked ready-to-eat products in the sale centers of isfahan province, iran

background: clostridium difficile (clostridioides difficile) is known as one of the main causes of pseudomembranous colitis and is considered an important enteropathogen in humans. antibiotic use has been introduced as one of the most significant risk factors contributing to the prevalence and incidence of “clostridium difficile nosocomial infection”. the aim of this study is to investigate the prevalence, antibiotic resistance, and genetic diversity of clostridium difficile in semi-cooked ready-to-eat products in stores of isfahan province in iran.methods: a total of 240 samples of semi-cooked ready-to-eat products, including potato kuku, herb kuku, cordon bleu, and chicken nuggets (each 60 samples), were randomly collected from stores of isfahan province between july 2020 and february 2021. clostridium difficile was identified by culturing the samples in clostridium difficile moxalactam norfloxacin. to determine the characteristics of the toxins, tcda and tcdb genes were detected through multiplex polymerase chain reaction (m-pcr). the antibiotic sensitivity of the isolates was determined based on the minimum inhibitory concentration (mic) test. the results were analyzed using chi-square test in spss software and p-value was considered significant at 0.05. findings: 37 samples were infected with clostridium difficile. the contamination rate was 13.3%, 20.0%, 11.6%, and 16.6% in potato kuku, herb kuku, cordon bleu, and chicken nugget, respectively. the highest contamination was related to the semi-cooked herb kuku product. tcda and tcdb gene toxins were identified in 15 and 17 isolates of clostridium difficile, respectively. among clostridium difficile strains, the highest level of resistance was seen for ampicillin and penicillin antibiotics, and the highest sensitivity was related to chloramphenicol and metronidazole. conclusion: semi-cooked ready-to-eat products can be considered as potential sources of antibiotic-resistant clostridium difficile. thus, complete cooking process of semi-cooked ready-to-eat foods at appropriate temperature and time (85° c and 30 minutes) and following hygiene principles in food processing plants can prevent the probable gastrointestinal infections caused by strains of clostridium difficile in consumers.