بررسی بیان نسبی ژن متالوتیونین به عنوان نشانگر زیستی آلودگی در کبد جوجه های گوشتی تغذیه شده با نانو ذرات نقره پوشش داده شده بر زئولیت در شرایط تنش گرمایی

مقدمه و هدف: با توجه به ممنوعیت استفاده از آنتی بیوتیک ها به ‌عنوان یک افزودنی محرک رشد از سال 2006 درصنعت پرورش جوجه های گوشتی، محققان همواره به دنبال جایگزین مناسبی برای آنتی بیوتیک ها هستند. نانوذرات نقره با توجه به ویژگی های ضد باکتریایی، ضد قارچی و ضد ویروسی آن ها به‌ عنوان یکی از جایگزین های پیشنهادی برای آنتی بیوتیک ها مورد توجه قرار گرفته است و هدف از انجام این آزمایش بررسی اثر نانوذرات نقره پوشش داده شده بر زئولیت بر میزان بیان ژن متالوتیونین به‌عنوان زیست ‌نشانگر فلزات سنگین، در سلول های بافت کبد جوجه های گوشتی بود. مواد و روش ها : برای انجام این تحقیق آزمایشی شامل تیمار شاهد یا کنترل، تیمار شاهد مکمل شده با 1 درصد زئولیت، تیمار شاهد مکمل شده با 1 درصد زئولیت پوشش داده شده با 0/5 درصد نانونقره، تیمار شاهد مکمل شده با 0/15 درصد اسید ارگانیک و تیمار شاهد مکمل شده با 1 درصد زئولیت پوشش داده شده با 0/5 درصد نانونقره و 0/15 درصد اسید ارگانیک، در شرایط اعمال تنش گرمایی و بدون تنش گرمایی طراحی شد. نمونه برداری از بافت کبد در روزهای 21 و 42 دوره پرورش انجام و به ‌منظور انجام مطالعات بیان ژن، rna استخراج و با استفاده از دستگاه الکتروفورز کیفیت آن بررسی شد و پس خالص سازی، سنتز cdna صورت گرفت. در ادامه واکنش زنجیره‌ای پلیمراز برای نمونه‌های cdna حاصل از بافت‌ها، برای ژن متالوتیونین و همچنین بتااکتین به عنوان ژن مرجع، انجام شد. یافته ها: نتایج حاصل از این آزمایش در روز 21 دوره پرورش، نشان ‌دهنده افزایش بیان معنی‌دار این ژن در بافت کبد جوجه‌های گوشتی تغذیه شده با تیمار زئولیت (z بود (0/05>p). بیان ژن متالوتیونین در بافت کبد جوجه های تغذیه شده با تیمار نانوذرات نقره پوشش داده شده بر زئولیت مکمل شده با 1 درصد اسید ارگانیک در روز 42 دوره پرورش بدون تنش گرمایی و همچنین در روز 42 دوره پرورش با اعمال تنش گرمایی افزایش بیان معنی‌داری در ژن متالوتیونین در جوجه های تغذیه شده با تیمار نانوذرات نقره پوشش داده شده بر زئولیت (ns) و تیمار زئولیت  مشاهده شد (p<0/05). نتیجه گیری: نتایج حاصل از پژوهش حاضر بیان می‌کند که ژن متالوتیونین می‌تواند به‌عنوان یک زیست نشانگر قابل اعتماد فلز سنگین در شرایط نرمال و تنش گرمایی در جوجه‌های گوشتی در نظر گرفته شود.

evaluation of metallothionein gene as a biomarker in the liver of broilers fed silver nanoparticles coated on zeolite in heat stress conditions

introduction and objective: due to the ban on the use of antibiotics as a growth promoter in the broiler industry since 2007, researchers are always looking for a suitable alternative to antibiotics. silver nanoparticles with antibacterial, antifungal and antiviral properties were used as one of the proposed alternatives to antibiotics and the purpose of this study was to evaluate the effect of coated silver nanoparticles on zeolite on the expression of metallothionein gene as a biomarker of heavy metals in the liver cells of broiler chickens.materials and methods: in this experiment, ross 308 broiler chickens were allocated to five experimental diets: control or basal diet, basal diet supplemented by 1% zeolite, basal diet supplemented by 1% zeolite coated with 0.5% nanosilver, basal diet supplemented by 0.15% organic acid and basal diet supplemented by 1% zeolite coated with 0.5% nanosilver and 0.15% organic acid were designed under normal and heat stress conditions. liver tissue samples were collected on days 21 and 42 of rearing period. in order to perform gene expression studies, rna was extracted and its quality was evaluated by electrophoresis and after purification, cdna synthesis was performed. in the following the polymerase chain reaction was performed for tissue cdna samples for metallothionein gene and also betaactin as reference gene. results: the results showed a significant increase in expression of metallothionein gene in the liver tissue of broilers in zeolite treatment on d 21 (p<0.05). also, on d 42 of rearing period without heat stress conditions, a significant increase in metallothionein gene expression were observed on silver nanoparticles coated on zeolite and 0.15% organic acid (nsoa) treatment. also, on d 42 under heat stress conditions the results showed a significant increase in zeolite (z) and silver nanoparticles coated on zeolite (ns) treatments in liver tissue in comparison with control treatment (p<0.05). conclusion: the results of present study indicated that metallothionein gene could be considered as a reliable heavy metal biomarker under normal and heat stress conditions in broiler chickens.