ارزیابی مولکولی کارایی شیمی درمانی و کشت مریستم برای تولید هفت رقم گلابی(pyrus communis l.) عاری از ویروس

این مطالعه با هدف تولید نهال سالم گلابی جهت تکثیر و ایجاد یک باغ سالم مادری در سال 1393 در پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی ایران (ابری) انجام شد. آزمایش‌ها با ارزیابی کارایی شیمی‌درمانی (تیمارهای ریباویرین با غلظت‌های صفر، 20، 40 و 80 میلی‌گرم) و کشت مریستم انتهایی (در سه اندازه: کوچک‌تر از 2/0 میلی‌متر، بین 2/0 تا 7/0 میلی‌متر و بزرگ‌تر از 7/0 میلی‌متر) بر حذف ویروس (aclsv، asgvو aspv) از هفت رقم گلابی (ابته‌فتل، بیروتی، درگزی، کوشیا، لوئیزبون، ملینا و اسپادونا) صورت گرفتند. در ابتدا حضور ویروس‌های aclsv، asgv و aspv در نمونه‌های مادری با روش rtpcr بررسی شد و تمام ریز نمونه‌ها به هر سه ویروس آلودگی داشتند به‌جز ارقام ابته‌فتل و بیروتی که عاری از ویروس asp بودند. تیمارهای شیمی‌درمانی و کشت مریستم در شرایط درون شیشه‌ای انجام شد. ریز شاخه‌های رشد یافته از مریستم توسط rtpcr برای هر سه ویروس مورد آزمایش قرار گرفتند. نتایج نشان داد که افزایش غلظت ریباویرین و کاهش اندازه مریستم در افزایش کارآیی حذف هر سه ویروس بسیار موثر بود. همچنین واکنش ارقام و ویروس‌های موردمطالعه به تیمارهای این پژوهش متفاوت بود. نمونه‌هایی که توسط rtpcr سالم تشخیص داده شدند، تکثیر و ریشه‌دار شده و به گلدان منتقل شدند تا بتوانند به‌منظور ایجاد باغ مادری سالم مورداستفاده قرار گیرند.

Molecular assessment of Chemotherapy and meristem culture efficiency to production of seven cultivars of virus free pear

This study was aimed to production of healthy primary pear plants for propagation and establishment of a high health maternal orchard in 2014 at Agriculture Biotechnology Research Institute of Iran (ABRII). The experiments were conducted by evaluate the effectiveness of the chemotherapy treatments (Ribavirin (0, 20, 40 and 80 mg/l) and the sizes of apical meristems culturing (less than 0.2 mm, between 0.2 to 0.7 mm and larger than 0.7 mm) on virus eradicate (ACLSV, ASPV, ASGV) from seven pear cultivars ("Abate Fetal", "Beiruti", "Coscia", "Dargazi", "Louise Bonne", "Mellina" and "Spadona"). At first maternal samples were tested for ACLSV, ASGV and ASPV by RTPCR and all explants had been infected with all three viruses except Fettel and Beirut that were free from ASPV. We performed the chemotherapy treatments then meristems were cultured and grown in vitro. Regenerated shoots from meristem were tested by RTPCR for all three viruses. The results showed that increasing the concentration of ribavirin and reducing the size of cultivated meristem was effective on all the three viruses’ elimination from explants. Also the responses of studied cultivars and virus varieties were different in treatments of this research. Samples that were diagnosed virus free by using RTPCR, were proliferated, rooted and transferred into the pots to be used for later propagation and establishment of maternal orchard.