Combination of Cry1ac and Cry2a To Produce Resistance Against Helicoverpa Armigera in Cotton

Genetic manipulation to get desirable characters in cash crops like cotton remains the prime objective of crop biotechnology. to produce transgenic plants resistant against bollworms, newly emerged embryos of mnh-786 cotton variety were transformed with agrobacterium tumefaciens strain lba4404 harboring the plasmid pkhg4 vector containing cry1ac+cry2a genes under the control of camv35s promoter. the integration and expression of these genes were evaluated by pcr, florescent in-situ hybridization (fish), and elisa, respectively. out of 700 putative transgenic cotton plants, 10 plants (1.03% transformation efficiency) showed the presence of genes cry1ac+cry2a through pcr analysis. in vitro, insect feeding bioassay was done for estimation of mortality percentage of helicoverpa armigera. insect mortality rate and morphological characteristics of bt cotton were analyzed by phenotypic correlation, path coefficient regression and covariance to evaluate the advantage of transgenic technology in numerical terms. statistical analysis indicated significant positive correlation between insect mortality and cotton seed yield. helicoverpa armigera mortality data produced a directly proportional relation with cotton seed yield. the results of this study support the improvement of cotton defense mechanism against insects and natural competitors through genetic modification.

ترکیب Cry1Ac و Cry2A برای ایجاد مقاومت علیه Helicoverpa armigera در پنبه

دستکاری ژنتیکی برای ایجاد ویژگی های مطلوب در گیاهان پر فروش منجمله پنبه همچنان هدف اصلی بیوتکنولوژی (زیست فناوری) گیاهان است. برای تولید گیاهان تراریخته مقاوم علیه کرم غوزه (bollworm)، نطفه های تازه رقمMNH786 پنبه با اگروباکتریوم تومفاسینس با سویه LBA4404 با پلاسمید pKHG4 ناقل ژن های Cry1Ac+Cry2A تحت کنترل CaMV35S راه انداز(promoter) تراریخته شد. برای ارزیابی یکپارچگی و بیان این ژن ها، به ترتیب ازPCR، دورگه سازی درجای فلورسنتی(FISH)، وELISA استفاده شد. در میان 700 بوته پنبه فرضا (putative) تراریخته، 10 بوته (03/1% راندمان تراریختی) حضور ژن های Cry1Ac+Cry2A را با روش تحلیل PCR نشان دادند.در آزمون درون شیشه، زیست آزمون تغذیه حشرات برای برآورد (mortality percentage ) درصد میرندگی Helicoverpa armigera به کار رفت. نرخ میرندگی حشرات و ویژگی های مورفولوژیکی پنبه Bt با همبستگی فنوتیپی، رگرسیون ضریب مسیر، و کوواریانس تحلیل و تجزیه شد تا بتوان فواید فناوری تراریختی را به صورت عددی برآورد کرد. تحلیل آماری به همبستگی مثبت معناداری بین میرندگی حشرات و عملکرد پنبه دانه اشاره داشت. داده های مرگ و میر Helicoverpa armigera یک رابطه مستقیم و متناسب با عملکرد پنبه دانه به دست داد. از نتایج این آزمایش چنین برمیآید که با تغییرات ژنتیکی می توان سازو کار دفاعی پنبه را برعلیه حشرات و رقبای طبیعی بهبود بخشید.