response surface methodology to optimize hydrolysis parameters in production of antioxidant peptides from wheat germ protein by alcalase digestion and identification of antioxidant peptides by lc-ms/ms

The antioxidant capacity of wheat germ protein hydrolyzed by alcalase was optimized using response surface methodology (rsm). the optimum hydrolyzing parameters were found at temperature of 52.28 °c, time 233 minutes, and e/s 1.46 %. the amino acids profiles of intact and hydrolyzed proteins showed that wheat germ protein hydrolysate (wgph) had higher percentage of hydrophobic amino acids than that of intact protein. wgph prepared in optimum condition was fractionated by rphplc. the obtained fractions were subjected to abts assay for antioxidant capacity evaluation. the fraction with higher antioxidant value was then exposed to further analysis by lcesi/ms/ms. the sequences of the peptides were found to be tvggapagrivme (1257.66 da) and gnpiprepgqvpay (1494.77 da).

روش سطح پاسخ جهت بهینه سازی پارامترهای هیدرولیز برای تولید پپتیدهای آنتی-اکسیدانت از پروتئین جوانه گندم با استفاده از آلکالاز. شناسایی پپتیدهای آنتی‌اکسیدانت با روش LC-MS/MS

در این مطالعه، اثرات شرایط هیدورلیز (زمان، نسبت آنزیم به سوبسترا، دما) بر فعالیت آنتی اکسیدانی پروتئین جوانه گندم هیدرولیز شده با آلکالاز مورد بررسی قرار گرفت. و با روش سطح پاسخ بهینه سازی شد. پارامترهای بهینه هیدرولیز در دمای 28/52 درجه سانتی گراد، زمان 233 دقیقه و نسبت آنزیم به سوبسترا 46/1% یافت شد. پروفایل آمینواسید پروتئین های هیدرولیز شده و دست نخورده نشان داد که هیدرولیزات پروتئین جوانه گندم درصد بالاتری از اسیدآمینه های هیدروفوبیک را نسبت به پروتئین دست نخورده دارند. سپس فرکشن ها در نقطه بهینه با استفاده از RPHPLC جدا شدند و فرکسیون با بالاترین فعالیت مهار رادیکال ABTS با استفاده از LCESI/MS/MS شناسایی شد. نتایج تعیین توالی نشان داد که پپتیدهای خالص شده دارای توالی TVGGAPAGRIVME (66/1257 دالتون) و GNPIPREPGQVPAY (77/1494 دالتون) می باشند.