مهار تولید Ros از طریق افزودن آنتی اکسیدان های هدفمند میتوکیو و تاثیر آنها بر عملکرد اسپرم‌های منجمد-یخگشایی شده خروس

یکی از دلایل اصلی کاهش زنده‌مانی اسپرم منجمد، تولید گونه‌های فعال اکسیژن می‌باشد (ros). از آنجائیکه انتخاب آنتی‌اکسیدان‌ها برای مهار تولید ros به دلیل عدم توانایی آنها در نفوذ به محل اصلی تولید ros (میتوکندری) تاکنون کارایی خوبی در برنامه‌های انجماد اسپرم نداشته است؛ لذا، به این منظور ما روش جدیدی را برای مهار تولید ros در فرایند انجماد اسپرم خروس بررسی کردیم. در این مطالعه 14 خروس )سویه تجاری راس( با 28 هفته سن استفاده گردید. نمونه‌های منی پس از ارزیابی اولیه با یکدیگر مخلوط شده (pooling) و پس از رقیق‌سازی و افزودن ماده mitoq در پنج سطح (صفر، 0.05، 0.1، 0.2 و 0.4 نانومولار) منجمد گردیدند. پس از یخ‌گشایی، شاخص‌های درصد زنده‌مانی ، پارامترهای تحرک اسپرم ، یکپارچگی‌غشای اسپرم ، میزان لیپید پراکسیداسیون و مورفولوژی اسپرم مورد ارزیابی قرار گرفتند. تجزیه و تحلیل داده‌ها بوسیله رویه glm با استفاده از نرم افزار sas(9.3) در قالب طرح کاملا تصادفی با پنج تیمار و پنج تکرار انجام گرفت. برای مقایسه میانگین تیمارها از آزمون توکی استفاده شد. نتایج حاصل از مطالعه حاضر نشان داد که افزودن mitoq به محیط انجماد اسپرم خروس باعث کاهش قابل توجه لیپیدپراکسیداسیون و افزایش میزان زنده‌مانی، یکپارچگی غشای پلاسمایی و مورفولوژی اسپرم شد. نتایج حاصل نشان داد که افزودن mitoq در سطح 0.1 نانومولار سبب بهبود تحرک کل و پیش‌رونده، زنده‌مانی، یکپارچگی غشای پلاسمایی اسپرم ها نسبت به گروه شاهد شد.

Inhibition of ROS production by adding targeted antioxidants MitoQ and their effect on the performance of freezethawed rooster sperm

One of the main reasons for the reduced viability of cryopreserved sperm is the production of active oxygen species (ROS). Since the selection of antioxidants to inhibit ROS production due to their inability to penetrate the original site of ROS production (mitochondria) has not been effective in sperm cryopreservation programs, therefore, for this purpose, we investigated a new method for inhibiting Ros production in the cryopreservation of roster sperm. In this study, 14 mature roosters (Ross commercial strain) with 28 weeks of age were used. First semen samples were evaluated for having the necessary standards. Then, they were pooled, diluted and supplemented with five levels of MitoQ (0, 0.05, 0.1, 0.2 and 0.4 nm) before cryopreservation. After freezethawing, the parameters of viability, sperm motility parameters, plasma membrane integrity, lipid peroxidation and sperm morphology were evaluated. Data analysis was done by GLM procedure using SAS software (9.3) in a completely randomized design with five treatments and five replications. Tukey test was used to compare the mean of treatments. The results of this study showed that the addition of MitoQ to the rooster semen cryopreservation medium significantly reduced lipid peroxidation and increased survival, plasma membrane integrity and sperm morphology. The results showed that, the addition of MitoQ at 0.1 nm improved total and progressive motility, viability, and plasma membrane integrity of sperms compared to the control group, and also significantly decreased MDA concentration compared to the control group (p <0.05) .