بررسی استفاده از روش دات-الیزای سه‌گانه برای تشخیص هم‌زمان ‌نئوسپورا کانینوم، bvd و ibr

سه عامل بیماری‌زای نئوسپورا کانینوم (neospora caninum)، رینوتراکئیت گاوی (ibr) و اسهال ویروسی گاوی (bvd)، از مهم‌ترین عوامل عفونی بروز سقط جنین در گاو در جهان هستند. جهت تشخیص این عفونت‌ها از روش الیزا استفاده می‌شود. هدف از این مطالعه طراحی تست تشخیصی بود که قادر به شناسایی راحت و هم‌زمان این عوامل عفونی باشد. بدین منظور نمونه‌های سرم از 184 گاو با سابقه سقط در یک سال گذشته در مناطق شمال فارس جمع‌آوری گردید سپس نمونه‌ها با استفاده از کیت‌های تجاری الیزا و روش الیزای نقطه‌ای چندگانه ارزیابی گردید. نتایج بدست آمده از کیت تجاری نشان داد که میزان موارد مثبت برای سه عامل عفونی مورد مطالعه به ترتیب 32 درصد برای نئوسپورا کانینوم، 98.2 درصد برای ibr و 64.1 درصد برای bvdv می‌باشد در حالی که نتایج مثبت با استفاده از روش الیزای نقطه‌‌ای برای همین سه مورد به ترتیب 29.3 درصد، 93.5 درصد و 79.3 درصد است. با استفاده از روش آماری کاپا توافق این دو روش برای تک‌یاخته نئوسپورا کانینوم، ویروس ibr و ویروس bvdv در حد مناسب تا خیلی خوب ارزیابی گردید. همچنین نتایج آماری مک‌نمار نشان داد که بین دو روش برای هیچ‌کدام از عوامل مورد نظر در این پژوهش تفاوت معناداری وجود ندارد. با توجه به نتایج این مطالعه مشخص شد که کیت الیزای نقطه‌ای چندگانه، می‌تواند به عنوان روشی ساده و مقرون به صرفه جهت تشخیص هم‌زمان سه عامل مهم سقط در گاو مورد استفاده قرار گیرد. این مطالعه گامی نخست در طراحی یک کیت چندگانه برای تشخیص عوامل عفونتی سقط در گاو برای اولین بار در جهان می‌باشد و می‌تواند در آینده با انجام مطالعات تکمیلی به عنوان یک کیت تجاری معرفی گردد.

Study of using the triple DotELISA for simultaneous diagnosis of Neospora caninum, IBR and BVDV

The major agents cause abortion in cattle are Neospora caninum, Infectious Bovine Rhinotracheitis (IBR), and Bovine Viral Diarrhea (BVD). These infection agents cause reproductive disorders which can lead in economic loss in dairy and beef herds. Serological test including ELISA are calculated as the best diagnostic ways for Neospora caninum, IBR, and BVD. The aim of this study was to develop a multiplex DotELISA kit for simultaneous detecting of three abortion agents: Neospora caninum, IBR, and BVD. The blood samples were collected from 184 cows with a history of abortion in the northern of Fars province. Sera were analyzed by Multiplex DotELISA and commercial ELISA kits, and the results were compared to each other. The commercial kit showed 32%, 98,9% and 64.1% positive results for Neospora caninum, IBR, and BVD, respectively. On the other hand, positive results for Multiplex DotELISA showed 29.3%, 93.5% and 79.3% for these agents. Kappa agreement assessment demonstrated that appropriate agreement between multiplex DotELISA results and ELISA kits, and McNemar test showed that both methods have the same efficacy for the identification of these abortion agents. The results of this study revealed that multiple DotELISA kit, could be a simple and economical method for the simultaneous detection of three abortion agents in cattle. This experimentally kit is designed as the first step in designing a multiple kit for the diagnosis of infections in cows which could be introduced with complementary studies as a commercial kit in the future.