بررسی مورفولوژیکی و ملکولی کیست‌های هیداتید گوسفندان کشتار ی شهرستان مشهد

کیست هیداتید یکی از بیماری‌های مهم زئونوز در ایران است. کرم اکینوکوکوس گرانولوزوس عامل این بیماری واجد سویه‌های متعددی است. هر یک از سویه‌ها واجد بیولوژی متفاوتی بوده که شناسایی آنها در کنترل بیماری در هر منطقه از اهمیت زیادی برخوردار است. هدف این مطالعه شناسایی سویه‌های اکینوکوکوس گرانولوزوس مولد کیست هیداتید گوسفندان کشتاری با استفاده از روش‌های میکروسکوپی و ملکولی بود. در این مطالعه، کبدها و ریه‌ها آلوده به کیست هیداتید گوسفندان جمع‌آوری و به آزمایشگاه انگل شناسی منتقل گردید. ابتدا پرتواسکلولکس‌های کیست جدا سازی گردید و سپس شاخص‌های مورفولوژیک قلاب‌های روستلوم پروتواسکولکس‌ها با استفاده با عدسی چشمی مدرج اندازه‌گیری شدند.  همچنین dna پروتواسکولکس هر نمونه  استخراج  شده و آزمایش pcr بر روی ژن its1 انجام شد. سپس محصول pcr توسط آنزیم bsh1236i مورد هضم آنزیمی قرار گرفت. در این بررسی شاخص‌های مورفولوژیکی قلاب‌های پروتواسکولکس‌ها به ترتیب، طول کلی قلاب بزرگ1.13±24.48 میکرون و طول تیغه‌ی قلاب بزرگ 0.5±12.27 میکرون و طول کلی قلاب کوچک 0.8±19.4 میکرون و طول تیغه‌ی قلاب کوچک 1.1±9.07 میکرون اندازه‌گیری شدند. همچنین الگوی بدست آمده در آزمایش rlfp-pcr امکان وجود هریک از سویه‌های g1,g2,g3 اکینوکوکوس گرانولوزوس را نشان داد. برای تمایز سه سویه از یکدیگر، محصول pcr واجد واکنش، تعیین توالی شدند. آنالیز همردیفی توالی‌های بدست آمده وجود سویه g1 را دراین مطالعه را تایید نمود. بر اساس نتایج بدست آمده، وجود سویه گوسفندی g1 در گوسفندان کشتاری مشهد تایید گردید.

A morphological and molecular study of hydatid cyst in slaughtered sheep in Mashhad area

Hydatid cyst is an important zoonotic diseases the agent of disease is Echinococcus granolusus that have many strains. Each strain has different biology that identification of them is critical for control of hydatid cyst in every region. The aim of study was to identify Echinococcus granolusus strains in slaughtered sheep using morphological and molecular methods in Mashhad area. Many infected liver and lung with hydatid cysts were collected and transferred to laboratory. First, protosclocies of hydatid fluid were isolated, then the morphological characters of rostellar hook protosclocies were examined using light microscope. Thus, DNA of protosclocies in each sample was extracted with commercial Kit. The ITS1 fragments of extracted DNA were amplified by PCR. The PCR product was digested with Bsh1236I enzyme. The size of total length large hooks, length blade of large hooks ,total length small hooks and length blade of small hooks were measured 24.47± 1.13μm, 12.27±0.5 μm, 19.4±0.8 μm and 9.07±0.7 μm, respectively. Based on pattern of PCRRLFP results, the existence of G1 G3 strains of Echinococcus granolusus were possible. Differentiation of three strains was done using sequencing analysis. The Blast analysis showed the presence of G1 strain in slaughtered sheep. The results was confirmed the presence of G1 strain of Echinoccocus in the slaughtered sheep of Mashhad area.