مطالعه و شناسایی خاصیت پروتئازی در زهرمار شاخدار ایرانی

مارها یکی از مفیدترین حیوانات این کره خاکی برای تولید انواع دارو، سرم‌ها و واکسن‌ها هستند. زهر مار عمدتا برای بی حرکت کردن و کشتن شکار می‌باشد و از نظر دفاعی احتمالا اهمیت حیاتی دارد. زهر مارها کاربردهای درمانی فراوانی دارد و در تحقیقات بیوشیمی بسیاری استفاده می‌شود. این مایع روغنی شکل، دارای رنگی سفید تا زرد و با ph اندکی اسیدی می‌باشند و مخلوط پیچیده‌ای از پلی پپتیدها، پروتئین‌های سمی، آنزیمی و مواد غیر پروتئینی هستند. غده سمی مار از نظر تشریحی شبیه به غده تغییر شکل یافته پاراتیروئید انسان است. این غده در اغلب مارها در فضایی واقع در پشت چشم و روی استخوان فک بالایی که به سمت پایین و عقب چشم امتداد دارد. به عبارت دیگر بین چشم و گوشه دهان قرار می‌گیرد. با حرکت سریع استخوان‌های سرو فشار وارده توسط ماهیچه‌ها به غده سمی، مقداری زهر از راه کانالی که به دندان سمی متصل است به شکار منتقل می‌شود. زهر همه‌ی مارها یکسان نیست اگرچه این عقیده وجود دارد که زهر مارها از اجداد بیولوژیکی مشترک به وجود آمده است. هدف در این مطالعه تشخیص و تعیین میزان فعالیت آنزیم پروتئاز در زهر مار شاخدار ایرانی از مناطق مختلف می‌باشد. در این پژوهش بر روی زهر مار شاخدار ایرانی از سه منطقه سمنان‌، کرمان و خوزستان تحقیق و بررسی به عمل آمد. ابتدا غلظت پروتئین‌های زهر این مار با استفاده از روش‌های لوری و برادفورد، تعیین گردیدکه میزان mg/ml 95/. گزارش گردید. در مرحله بعد، تعداد پلی پپتیدها و وزن مولکولی این پروتئین‌ها با استفاده از الکتروفورز عمودی مشخص گردید که به دو صورت احیایی و غیر احیایی انجام شد، و محدوده وزن مولکولی 15 تا 190 کیلودالتون تخمین زده شد که این پروفایل پروتئینی در خوزستان‌، کرمان و سمنان دارای تشابه نسبی بودند. انجام الکتروفورز native و زیموگرافی با سوبسترای کازئین، فعالیت پروتئولیتیک زهر مار شاخدار را تایید نمودو سنجش کمی فعالیت پروتئازی زهر با دو روش هضم کازئین و سوبسترای bapna معادل با u/ml 11.56 تعیین گردید.

Study of Protease Properties in Pseudocereastes Percicus Venom

Snakes are one of the most useful animals in the world for the production of medicines, sera and vaccines that are made from the venom. Venomous snakes have many therapeutic applications and are very useful in biochemical research. Snake venom is an oily liquid, white to yellow with a slightly acidic pH and is a complex mixture of polypeptides, toxic proteins, enzymes, pharmaceuticals and nonprotein substances. Venom of all snakes is not the same, although it is believed that venom of snakes originated from common biological ancestors.The aim of this study was to determine the activity of protease enzyme in venom of horned snake from different regions. In this study, the venom of the horned snake from three regions of Semnan, Kerman and Khuzestan was investigated. At first, the venom protein concentration of this snake was determined using Lowry and Bradford methods, which was reported to be 950 mg / ml (95%). In the next step, the number of peptides and molecular weight of these proteins were determined by vertical electrophoresis, which were performed in both reducing and nonreducing methods. And the molecular weight range of 15 to 190 kDa was estimated to have relative similarities in Khuzestan, Kerman and Semnan. Native electrophoresis and casein substrate electrophoresis confirmed the proteolytic activity of ruminant venom and quantitative determination of venom proteolytic activity was determined by BAPNA dilution and casein digestion 11.56 U/ml.