بررسی آلودگی احتمالی سوبستراهای سلولی مورد استفاده در تولید فرآورده های بیولوژیک در موسسه رازی به نانوباکتری‌ها به روش مولکولی

تولید واکسن‌های ویروسی و فرآورده‌های دارویی بر پایه سلولی، یک فرایند پیچیده است که در آن از مواد بیولوژیک متفاوتی (انواع سوبسترای سلولی مثل: تخم‌ مرغ جنین‌دار، سلول‌های پرایمری و لاین، مواد خام و افزودنی‌های محیط کشت با منشاء حیوانی و ویروس بذر) استفاده می‌گردد، که مراحل فوق را بالقوه نسبت به آلودگی‌ با عوامل ناخواسته آسیب‌پذیر می‌کند. nanobacteria همچون سایر عوامل ناخواسته می‌تواند از طریق مواد اولیه با منشاء دامی سبب آلودگی این قبیل فرآورده‌ها شود. در این تحقیق با راه‌اندازی آزمایش pcr جهت ردیابی اختصاصی nanobacteria نسبت به ارزیابی میزان آلودگی احتمالی سلول‌های موجود بخصوص سلول‌های لاین و دیپلوئید مورد استفاده در تولید واکسن در موسسه رازی اقدام بعمل آمد. بدین منظور سلول‌های مورد مصرف در بخش‌های تحقیق، تولید و کنترل کیفی فراورده‌های بیولوژیک جمع‌آوری و پس از استخراج dna، آزمایش pcr جهت تکثیر ناحیه 16s rrna nanobacteria احتمالی، بر روی آن‌ها انجام شد. از باکتری bartonella henselae بعنوان کنترل مثبت استفاده شد. در بررسی محصول pcr پس از الکتروفورز همان‌طور که انتظار می‌رفت، نمونه کنترل مثبت در واکنش pcr قطعه 558 جفت بازی را تکثیر کرد که این امر بیانگر صحت انجام واکنش‌ها بود. در ارزیابی آلودگی احتمالی سلول‌های فوق، کلیه سلول‌ها عاری از آلودگی به nanobacteria بودند. بدلیل عدم اطلاعات از میزان شیوع nanobacteria در جمعیت دامی، ارزیابی مقدار ریسک مقدور نیست. لذا توصیه می‌شود مطالعات جامعی در این خصوص صورت پذیرد.

Investigation of Nanobacteria contamination in cell substrate used in biological productions in Razi Institute by molecular method

Production of viral vaccines and also drugs products which are derive from cells produced in various biological materials, like cell substrates eg: fertile eggs, primary cells, cell lines, raw materials and additives used in culture media which have animal origin and seed virus which is used for culture have a complicated process. The above processes are naturally vulnerable for contamination to adventitious agents. The Nanobacteria like other adventitious agents can cause contamination through primary materials with animal origin for such a product. The aim of this study was to design a program for PCR which is specific for detection of probable presence of Nanobacteria in cells, especially in cell lines and diploids which is used in vaccine production in Razi institute. For this purpose the cells which are used in following departments, research, production and Quality control for biological products were collected and DNA was extracted for PCR expression on 16S rRNA area from Nanobacteria. Bartonella henselae was used as a positive control. As it was expected the results of PCR products after electrophoresis were positive for above organism and at the area of 558 bp replicated which it confirms the correctness of our experiment. The cells from all departments were negative for Nanobacteria, however for not having enough information for spread and risk evaluation of Nanobacteria in cattle population there are a great need for further investigation.