ارزیابی بیان فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت نوترکیب انسانی با کدون بهینه شده در دو سویه بیانی اشریشیا کلی Origami وBL21

سابقه و هدف: فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت (g-csf) به عنوان فاکتور رشد هماتوپوییتیک می ‌تواند سلول های بالغ خونی را تحریک نمایند و امروزه نوع نوترکیب آن در درمان نوتروپنی ناشی از شیمی درمانی سرطان های سرکوبگر میلویید، پیوند مغز استخوان، شیمی درمانی در لوسمی میلویید حاد و نوتروپنی مزمن و شدید به کار می رود. هدف از این مطالعه، مقایسه بیان g-csf نوترکیب انسانی در دو سویه از اشریشیاکلی بوده است.مواد و روش ها: ژن g-csfانسانی با تغییر کدون های آن به صورت بهینه شده برای بیان در سیستم پروکاریوتی، در وکتور pgem سنتز شده و در وکتور بیانی pet23a همسانه سازی شد. سپس وکتور pet/g-csf در دو سویه بیانی از اشریشیاکلی به نام origami و bl21، ترانسفرم شد و بیان آن در این دو میزبان مقایسه گردید.یافته ها: نتایج هضم آنزیمی، صحت مراحل کلونینگ را در وکتور pet23a نشان داد. همچنین تحت شرایط یکسان و بعد از القای میزبان ها با iptg، بیشترین بیان پروتیین rhg-csf در سویه origami e. coli مشاهده گردید..نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که سویه e. coli origami سویه مناسبی جهت بیان g-csf انسانی می باشد و این سویه می تواند به عنوان یک میزبان مناسب جهت بیان این پروتیین در مقیاس بالاتر پیشنهاد گردد.