بررسی اثر وزیکول های خارج سلولی جدا شده از سویه های بالینی هلیکوباکتر پیلوری در القای انتقال مزانشیمی اپیتلیال در روی رده سلولی hepg2 مقاوم به انسولین

سابقه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری (helicobacter pylori) یک پاتوژن گرم منفی بوده که قادر است وزیکول های خارج سلولی آزاد کند که حاوی پروتئین ها و عوامل بیماری زایی متعددی هستند. این باکتری علاوه بر بیماری های معده در ایجاد بیماری های خارج از معده مانند مقاومت به انسولین نیز نقش دارد. انتقال اپیتلیال-مزانشیمی یک فرآیند کلیدی در گسترش سرطان به شمار می رود که عوامل متعددی در شروع این فرآیند نقش دارند، اما با این حال نقش دقیق انسولین در انتقال اپیتلیال-مزانشیمی مشخص نشده است. هدف این مطالعه بررسی اثر وزیکول های خارج سلولی مشتق شده از هلیکوباکتر پیلوری در القای انتقال اپیتلیال-مزانشیمی در رده سلولی hepg2 مقاوم به انسولین می باشد.مواد و روش‌ها: در این مطالعه از دو سویه بالینی هلیکوباکتر پیلوری بدست آمده از بیماران مبتلا به گاستیریت و زخم معده استفاده شد. وزیکول های استخراج شده از این باکتری توسط اولتراسانتریفیوژ استخراج گردید. جهت بررسی اثر وزیکول های خارج سلولی هلیکوباکتر پیلوری در القای انتقال اپیتلیال-مزانشیمی در شرایط مقاومت به انسولین، مدل مقاومت انسولینی بر روی رده سلولی hepg2 ایجاد شد. آزمون rt-qpcr جهت بررسی میزان بیان ژن های کلیدی دخیل در فرآیند انتقال اپیتلیال-مزانشیمی همچون e-cadherin, snail, vimentin انجام شد.یافته‌ها: نتایج حاصل از rt-qpcr نشان داد، وزیکول های مشتق شده از هلیکوباکتر پیلوری در شرایط مقاومت به انسولین قادر به افزایش بیان ژن های snail ، vimentin و کاهش بیان ژن e-cadherin هستند.نتیجه‌گیری: نتایج بدست آمده از مطالعه حاضر نشان داد وزیکول های خارج سلولی حاصل از هلیکوباکتر پیلوری علاوه بر القای مقاومت انسولینی قادر به القای فرآیند انتقال اپیتلیال-مزانشیمی در رده سلولی hepg2 هستند. 

investigating the effect of extracellular vesicles isolated from clinical strains of helicobacter pylori on induction of epithelial-mesenchymal transition in insulin-resistant hepg2 cell line

aim and background: helicobacter pylori is a gram-negative and microaerophilic pathogen that can release extracellular vesicles (evs) containing proteins and different virulence factors. in addition to gastroduodenal diseases, this bacterium also plays a role in extra-gastroduodenal diseases such as insulin resistance (ir). epithelial-mesenchymal transition (emt) is considered a key process in the development of cancer, and several factors contribute to the initiation of this process, but the exact role of insulin in the emt process has not yet been elucidated. this study aimed to investigate the effect of h. pylori-derived evs on the induction of emt in the insulin-resistant hepg2 cell line.materials and methods: two clinical isolates of h. pylori were obtained from patients with gastritis and peptic ulcer. ultracentrifugation was used to extract h. pylori-derived evs. in order to investigate the effect of evs on the induction of emt in ir, the hepg2 cell line was used to establish the ir model. an rt-qpcr assay was performed to evaluate the expression level of key genes involved in the emt process, such as e-cadherin, snail, vimentin.results: the results of rt-qpcr showed that h. pylori-derived evs can increase the expression of snail and vimentin and decrease the expression of e-cadherin genes under ir conditions.conclusion: the results obtained from the present study showed that h. pylori-derived evs are capable of inducing the emt process in the hepg2 cell line in addition to inducing hepatic ir.