موقعیت‌یابی ایمونوهیستوشیمیایی گرلین در بافت جفت گاو

در این مطالعه موقعیت‌یابی ایمنوهیستوشیمی گرلین در بافت‎ جفت گاو مورد بررسی قرار گرفت. به‌منظور موقعیت‌یابی گرلین در جفت گاو، کل محتوای آبستنی پنج گاو ماده از کشتارگاه جمع‌آوری شده و به آزمایشگاه منتقل شد. پس از جداسازی جفت، بلوک‌هایی جهت آزمایش ایمونوهیستوشیمی تهیه گردید. برای انجام موقعیت‌یابی ایمونوهیستوشیمی گرلین، از آنتی‎بادی مونوکلونال موشی ضد گرلین به‌عنوان آنتی‎بادی اولیه و آنتی‌بادی پلی‌کلونال الاغی ضد ایمنوگلوبین (g (hrpبه‌عنوان آنتی‌بادی ثانویه استفاده شد. در مطالعه حاضر جهت راه‌اندازی آزمایش ایمنوهیستوشیمی از نمونه بیضه قوچ که قبلاً وجود گرلین در آن تایید شده بود به‌عنوان کنترل مثبت استفاده شد که نتایج حاکی از واکنش ایمونوپروکسیداز در کنترل مثبت بود. هم‌چنین از سرم خرگوشی به‌جای آنتی بادی اولیه به‌عنوان کنترل منفی استفاده شد که نتایج حاکی از اختصاصی‌بودن آنتی‌بادی گرلین بود و واکنش ایمونوپروکسیداز در کنترل منفی مشاهده نگردید. نتایج به‌دست‌آمده نشان داد که گرلین در سلول‌های تک‌هسته‌ای تروفوبلاست و سلول‎های چندهسته‌ای سین سیتیوم بافت جفت گاو بیان می شود به این ترتیب که واکنش ایمونوپراکسیداز در سلول‌های تک‌هسته‌ای تروفوبلاست و سلول‎های چندهسته‌ای سین سیتیوم بافت جفت گاو مشاهده شد. بر اساس نتایج حاصل  از این پژوهش، می توان گفت که گرلین در بافت جفت گاو بیان می شود، اما مطالعات بیشتر روی نقش های دقیق این هورمون در جفت و در خلال آبستنی توصیه می‌شود.

Immunohistochemical localization of Ghrelin in Cow Placenta Tissue

In the current study, immunohistochemical localization of Ghrelin was investigated in placenta tissue of Holstein cows. In order to localization of Ghrelin, pregnancy content of 5 cows were collected in abattoir and transferred to the laboratory. After, placenta separation, paraffin blocks were prepared. Mouse monoclonal antighrelin antibody as the primary antibody and donkey antirabbit IgG (HRP) Polyclonal antibody as the secondary antibody were used to localise ghrelin in bovine placenta immunohistochemically. In the present study, to set up the immunohistochemistry test, the ram’s testicular sample that existence of ghrelin had previously been confirmed in it,, was used as a positive control. The results indicated that immunoprooxidase reaction was performed in positive control. Also, the serum of rabbit was used as negative control instead of primary antibody. The results demonstrated that the antibody was specific for ghrelin and no immunoprooxidase reaction was observed in negative control. The results showed that ghrelin is expressed in mono and syncytium multinuclear trophoblast cells of bovine placenta, so that the immunoperoxidase reaction was observed in mono and syncytium multinuclear trophoblast cells in bovine placenta. In general, according to the results of the current study, it can be concluded that ghrelin is expressed in the bovine placenta tissue; however, future studies should focus on the precise role of the hormone in the placenta during pregnancy.