بیان ژن سرین پروتئاز از باکتری virgibacillus natechei براساس سنتز مصنوعی ژن

مقدمه: ﻫﯿﺪروﻟﯿﺰ پروتئین ضایعات آبزیان یک اﺳﺘﺮاﺗژی ﻣﻨﺎﺳﺐ و اﻗﺘﺼﺎدی ﺟﻬﺖ دﺳﺘﯿﺎبی ﺑﻪ ﻣﺤﺼﻮﻻت ﺑﺎ ارزش می باشد. در سال های اخیر، با معطوف شدن توجه محققان به استفاده از فناوری سبز و ایمن در هیدرولیز پروتئین های حاصل از ضایعات آبزیان و انتخاب جایگزین مناسب برای مواد شیمیایی، آنزیم های پروتئازی به این صنعت معرفی شده اند. مواد و روش ها: در مطالعه حاضر به منظور تولید آنزیم نوترکیب بعد از انتقال ژن سنتز شده سرین پروتئاز به درون وکتور pet28a، سازه ایجاد شده به درون میزبانe. coli bl21(de3) انتقال یافت و درستی انتقال با انجام colony pcr مورد بررسی قرار گرفت. سپس بیان آنزیم نوترکیب با غلظت یک میلی مولار iptg در شرایط دمایی 28 درجه سانتی گراد در مدت زمان 8 ساعت انجام شد. نتایج: نتیجه ترشح پروتئین بر روی sdspage با نمایان شدن باندی با اندازه تقریبی 31 کیلودالتون مشخص شد. بحث و نتیجه گیری: با توجه به موفق بودن تولید سرین پروتئاز از باکتری virgobacillus natechei به کمک سنتز مصنوعی ژن کد کننده این آنزیم، چنان چه فعالیت و ویژگی های بیوشیمیایی آنزیم تخلیص شده مناسب باشد و مطالعات تکمیلی امکان تولید بهینه و مقدار بالایی را تایید نمایند، می توان امیدوار بود که این آنزیم نوترکیب گزینه مناسبی برای استفاده در صنایع مختلف از جمله صنایع شیلاتی باشد.

the expression of serine protease gene from virgobacillus natechei based ongene artificial synthesis

introduction: protein hydrolysis of aquatic wastes is an appropriate and economic strategyto obtain valuable products. in recent years, with researchers turning their attention to theuse of green and safe technology in the hydrolysis of proteins obtained from aquatic wastesand choosing a suitable alternative for chemicals, protease enzymes have been introduced tothis industry.materials & methods: in the present study, in order to produce a recombinant enzyme,after transferring the synthesized gene of serine protease into the vector pet28a, thestructure created in the host e. coli bl21(de3) was transferred, and the accuracy of thetransfer was checked by performing colony pcr. then, the expression of the recombinantenzyme was performed with a concentration of 1 mm iptg at a temperature of 28°c for 8hours.results: the result of protein secretion on sdspage was determined by the appearance ofa band with an approximate size of 31 kda.conclusion: considering the successful production of serine protease from the bacteriumvirgobacillus natechei with the help of artificial synthesis of the gene encoding this enzyme,we could hope that this recombinant enzyme would be a suitable option for use in variousindustries including fishing industry. this would happen if the activity and biochemicalcharacteristics of the purified enzyme are suitable and additional studies confirm thepossibility of optimal production at a high amount.