جداسازی و شناسایی بیوشیمیایی و ارزیابی فعالیت ضدمیکروبی باکتری های جدا شده از روده ماهیان دریایی جنوب ایران

مقدمه: در سال های اخیر، استفاده از مکمل های غذایی حاوی باکتری های پروبیوتیک در صنعت پرورش ماهیان دریایی بسیار مورد توجه قرار گرفته است. هدف از بررسی حاضر جداسازی باکتری های اسید لاکتیک و بررسی قابلیت پروبیوتیکی باکتری ها در شرایط برون تنی از روده ماهیان دریایی بود.مواد و روش ها: به این منظور نمونه ای ماهیان دریایی با وزن 300 تا 700 گرم از محیط دریایی سه استان بوشهر، هرمزگان و خوزستان تهیه گردید. جدایه های باکتریایی از 50 نمونه روده ماهیان مختلف جداسازی شدند. از مجموعه نمونه برداری های انجام شده 44 جدایه در محیط های کشت اختصاصی ام آر اس آگار جداسازی شدند. این باکتری ها براساس شاخص‌های اولیه پروبیوتیکی شامل: خاصیت ضدمیکروبی، مقاومت به اسید، نمک‌های صفراوی و عدم بیماری‌زایی برای ماهیان دریایی امتیازدهی و ارزیابی شدند. نتایج: در نهایت 10 جدایه با توان پروبیوتیکی جدا شد که 3 جدایه (1p، 6b و 2l) دارای پتانسیل بالاتری جهت معرفی به عنوان پروبیوتیک بودند. شناسایی نهایی جدایه های انتخابی براساس توالی یابی حاصل از ژن s rrna16 صورت گرفت. هر 3 جدایه بعد از توالی یابی سویه هایی از به ترتیب لاکتوباسیلوس پلانتاروم، لاکتوباسیلوس پنتوسئوس و لاکتوباسیلوس پلانتاروم مشخص گردیدند. این توالی ها با توالی های موجود در بانک ژن دارای قرابت 99 تا 100 درصد بودند. باکتری های مورد نظر قادر به تحمل محدوده اسیدی (3 تا 9)، صفرا (1.25 تا 3.75 درصد) به نسبت وسیعی بودند. هم چنین از لحاظ خاصیت ضدمیکروبی نسبت به عوامل بیماری زای یرسینیا روکری، آئروموناس هیدروفیلا، استرپتوکوکوس اینیه و لاکتوکوکوس گارویه مناسب بودند.بحث و نتیجه گیری: لذا براساس نتایج این تحقیق، از این جدایه ها پس از بررسی های درون تنی، می توان جهت اهداف پروبیوتیک در صنعت پرورش آبزیان به خصوص ماهیان دریایی پرورشی در منطقه مورد مطالعه استفاده نمود.

isolation and biochemical identification and evaluation of antimicrobial activityof bacteria isolated from the intestine of marine fishes in southern iran

introduction: in recent years, the use of dietary supplementation with probiotic bacteriahas been interested in the aquatic farming. the objective of this study was to isolate of lacticacid bacteria with probiotic potential from the intestine of the marine fish under in invitrocondition and based on probiotics characteristics.materials & methods: for this purpose, marine fish samples weighing 300- 700 gr fromactive farms were taken from the marine environment of bushehr, hormozgan andkhuzestan provinces. bacterial isolates were collected from 50 marine fish intestine. intotal, 10 strains were isolated in mrs agar media. the isolates were evaluated and rankedbased on the probiotic indication tests (bacterial antagonistic property, adhesion abilities tomucus, growth in intestine mucus, hydrophobicity, salinity, ph, temperature and bile saltresistance, extracellular enzyme production and the lack of pathogencity to aquatic).results: the probiotic potency of these 10 isolates was compared and finally 3 isolatesincluding p1, b6 and l2 were selected as the highest potent probiotic property. the finalidentification of the selected strains was done by sequencing of 16 s rrna gene afterassurance the absence of resistance genes for streptomycin, tetracycline and fluorophenicolantibiotics. after the sequencing the 3 isolates were identified as strains of lactobacillusplantarum, lactobacillus plantarum and lactobacillus pentoseous respectively. thesequences of these isolates had a 99 to 100 percent identity with the nucleotide sequencespublished in the gene bank database. these strains had the ability to resist in thetemperature of 10 to 37° c, salinity 0 to 30 g ppt and ph 3 to 9 values. also, these bacteriahad suitable adhesion to mucus, growth in intestine mucus, hydrophobicity, antimicrobialactivity against yersinia ruckeri, aeromonas hydrophila, streptococcus iniae andlactococcus garvieae and were resistant to bile salts. these strains had any enzymes suchas lipase, amylase and protease activity.conclusion: based on the results of this study, after in vivo studies, these isolates can beused for the purposes of probiotic in aquaculture, especially marine fish culture industry inthe study area.