تولید سلول های بنیادی پرتوان القایی از سلول های خون محیطی با استفاده از ریزمولکول ها

تولید سلول های بنیادی پرتوان القایی با استفاده از روش های ایمن و غیرویروسی نقش به سزایی در مهندسی بافت و طب بازساختی دارد. در این تحقیق سعی شد تا سلول های بنیادی پرتوان القایی را در حضور انواعی از ریزمولکول های شیمیایی از سلول های خون محیطی تولید نمود. سلول های تک هسته ای خونی با استفاده از روش فایکول جداسازی و تکثیر آن ها توسط لیپوپلی ساکارید القاء گردید. بازبرنامه ریزی لنفوسیت های استخراج شده با استفاده از ترکیبی از ریزمولکول ها مانند آزاسیتیدین، سدیم بوتیرات، کنپائولون و رپساکس که عمدتاً مدولاتورهای اپی ژنتیکی موثر بر ژن های دخیل در پرتوانی (oct4،sox2 ،klf4 ، c-myc) صورت پذیرفت. در ادامه سلول های بنیادی پرتوان القایی حاصله بر روی لایه تغذیه کننده فیبروبلاست جنین موش انتقال داده شده و مورد شناسایی قرار گرفتند. لیپوپلی ساکارید به طور چشمگیری منجر به افزایش تعداد سلول های خونی تک هسته ای بعد از 5 ساعت گردید. سلول های خونی پس از 14 روز تیمار با ترکیبات شیمیایی و ریزمولکول های مورد نظر به طور موفقیت آمیزی به سلول های بنیادی پرتوان القایی تبدیل شدند و سپس جهت تکثیر و حفظ خاصیت پرتوانی بر روی محیط حمایتی فیبروبلاست جنین موش قرار گرفتند. استفاده از ترکیبات شیمیایی و ریزمولکول ها روش ایمن و ارزان برای تولید موثر سلول های بنیادی پرتوان القایی از سلول های خونی می باشد و به کارگیری فیبروبلاست جنین موش به عنوان لایه تغذیه کننده فاکتورهای رشد مورد نیاز جهت حفظ حالت پرتوانی را تولید می کند.

generation of induced pluripotent stem cells from peripheral blood cells using small molecules

generation of induced pluripotent stem cells (ipscs) using safe and non-viral methods play pivotal role in tissue engineering and regenerative medicine. in current study, we aimed to generate ipscs from peripheral blood mononuclear cells (pbmc) in the presence of different small molecule and chemical compounds. pbmcs were isolated using ficoll gradient method and their proliferation was induced by lipopolysaccharide (lps). reprogramming of extracted pbmcs was mediated using a combination of small molecule such as 5-azacitidine, kenpaullone, sodium butyrate and repsox, which are generally epigenetic modulator of genes (oct4, sox2, klf4, c-myc) involved on pluripotent cell. then, resulted pluripotent stem cells were cultured and identified on feeder mefs. lps effectively caused an increase in the number of pmbcs after 5 hours. blood cells were successfully converted to ipscs after treatment with different chemical compounds and small molecules for 14 days and then transferred on supportive mouse embryonic fibroblasts. the use of small molecules is a safe and cost-effective method for generating ipscs from pbmcs. mouse embryonic fibroblasts serve as a feeder layer for production of growth factors and preserving pluripotency of stem cells.