|
|
روش ساده و کارا برای جداسازی dna ژنومیک از بافت های کهنه میگو ببری سبز( penaeus semisulcatus)، مناسب برای pcr معکوس
|
|
|
|
|
نویسنده
|
طحان زاد نوید ,حسینی جواد ,علیزاده رویا ,غلامی دشتی فریبا ,نظریان محمد
|
منبع
|
محيط زيست جانوري - 1395 - دوره : 8 - شماره : 4 - صفحه:227 -236
|
چکیده
|
انتخاب روش مناسب جهت استخراجdna سالم و دست نخورده از بافت هایی که مدت طولانی در الکل نگه داری شده اند، نقش مهمی در موفقیت آنالیزهای مولکولی دارد. هدف از این مطالعه، بهینه سازی یک روش ساده، تکرار پذیر، ایمن و قابل اعتماد جهت استخراج dna ژنومیک با کیفیت از بافت های قدیمی ماهیچه ای میگو ببری سبز ( penaeus semisulcatus ) بود. از مهم ترین مزایای این روش، پودر نمودن بافت در هاون چینی پس از خشک کردن در درجه حرارت 40 درجه سانتی گراد، عدم استفاده از نیتروژن مایع جهت پودر کردن بافت و کاهش زمان استخراج تا حدود 5 ساعت بود. به دلیل این که موفقیت در واکنش pcr معکوس، به شدت وابسته به کیفیتdna الگو است، جداسازی بخشی از ژن بتا اکتین با استفاده از این واکنش، جهت ارزیابی کیفیتdna استخراج شده، مورد توجه قرار گرفت. موفقیت در تکثیر و تعیین توالی بخشی از ژن بتا اکتین میگو ببری سبز، حاکی از آن است که dna حاصل از این روش از کیفیت لازم جهت واکنش فوق برخوردار است. با توجه به موفقیت آمیز بودن واکنش pcr معکوس، dna حاصل از این روش را می توان با موفقیت جهت انجام سایر مطالعات مولکولی از قبیل aflp، rflp و تکثیر قطعات بلند که نیازمند dna با کیفیت است، به عنوان الگو مورد استفاده قرار داد.
|
کلیدواژه
|
استخراج dna، بافت های قدیمی، پودر کردن، میگو ببری سبز
|
آدرس
|
دانشگاه خلیج فارس, دانشکده علوم و فنون دریایی, گروه زیست فناوری دریا, ایران, دانشگاه خلیج فارس, پژوهشکده خلیج فارس, گروه بیوتکنولوژی, ایران, دانشگاه خلیج فارس, دانشکده علوم پایه, گروه علوم سلولی و مولکولی, ایران, دانشگاه خلیج فارس, دانشکده علوم پایه, گروه علوم سلولی و مولکولی, ایران, دانشگاه خلیج فارس, دانشکده علوم پایه, گروه علوم سلولی و مولکولی, ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
A simple and efficient protocol for isolation of genomic DNA from shrimps’ old tissues of Green Tiger Shrimp,Penaeus semisulcatus: Suitable for Inverse PCR
|
|
|
Authors
|
Tahanzadeh Navid ,Hosseini Seyed Javad ,Alizadeh Roya ,Gholami Dashti Fariba ,Nazarian Mohammad
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|