evaluation of utilization of amplified blastocoel fluid dna gel electrophoresis band intensity as an additional minimally invasive approach in embryo selection: a cross-sectional study

Background: embryo selection for transfer is critical in assisted reproduction. the presence of dna in the blastocoel cavity of human blastocysts is assumed to be a consequence of common preimplantation chromosomal abnormalities.objective: this study examined the relationship between the amount of blastocoel fluid (bf) dna and the band intensity of amplified bf-dna in gel electrophoresis, considering the influence of ploidy status.materials and methods: this cross-sectional study categorizes blastocysts into 2 groups based on the array comparative genomic hybridization results by trophectoderm biopsy -the euploid and aneuploid group. after morphological scoring, a biopsy of bf was performed for whole genome amplification, followed by an assessment of band intensity and bf-dna quantification. the relationship between bf-dna levels, band intensity, and ploidy status were analyzed. results: the level of bf-dna was higher in the aneuploid group compared to the euploid group, but the difference was not statistically significant (p = 0.2). we observed that the band intensity was affected by the ploidy status of the embryos, although this difference was not statistically significant (p = 0.059). notably, electrophoresis band of all embryos with chromosomal loss was strong. no correlation was observed between embryo morphology and chromosomal ploidy (p = 0.8).conclusion: our findings indicate that bf-dna band intensity on agarose gel is not currently applicable for preimplantation embryo selection. it seems that embryos with chromosomal loss are more prone to dna release to bf. the disrelation between embryo morphology and ploidy status represents the necessity of minimally invasive embryo screening methods based on ploidy status. 

ارزیابی کاربرد شدت نوار ژل الکتروفورز dna مایع بلاستوسل تکثیرشده به عنوان یک رویکرد کم تهاجمی اضافی در انتخاب جنین: یک مطالعه مقطعی

مقدمه: انتخاب جنین برای انتقال در درمان‌های کمک‌باروری اهمیت حیاتی دارد. وجود dna در حفره بلاستوسل در بلاستوسیست­های انسانی به عنوان نتیجه‌ای از ناهنجاری‌های کروموزومی رایج پیش از لانه‌گزینی در نظر گرفته می‌شود.هدف: این مطالعه به بررسی رابطه بین مقدار dna مایع بلاستوسل (bf-dna) و شدت نوار ژل الکروفورز bf-dna تکثیرشده، با در نظر گرفتن اثر وضعیت پلوئیدی بر آن می‌پردازد.مواد و روش­ها: در این مطالعه مقطعی، جنین‌های بلاستوسیست بر اساس نتایج هیبریداسیون ژنومی مقایسه‌ای (acgh) از طریق نمونه­برداری تروفواکتودرم به دو گروه یوپلوئید و آنوپلوئید تقسیم‌بندی شدند. پس از امتیازدهی مورفولوژیک، نمونه­برداری از مایع بلاستوسل برای تکثیر کل ژنوم انجام شد و سپس شدت نوار و میزان bf-dna ارزیابی گردید. رابطه­ی بین مقدار bf-dna، شدت نوار، وضعیت پلوئیدی مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.نتایج: مقدار bf-dna در گروه آنوپلوئید نسبت به گروه یوپلوئید بالاتر بود، اما رابطه معنی­داری بین آنها وجود نداشت (2/0 = p). ما مشاهده کردیم که شدت نوار تحت تاثیر وضعیت پلوئیدی جنین‌ها قرار می‌گیرد، اگرچه این تفاوت از نظر آماری معنی‌دار نبود (059/0 = p). تمام بلاستوسیست‌های آنوپلوئیدی که دچار از دست دادن کروموزوم بودند، نوارهای قوی‌ روی ژل نشان دادند. بین مورفولوژی جنین و پلوئیدی کروموزوم ارتباطی وجود نداشت (8/0 = p).نتیجه­ گیری: یافته‌های ما نشان می‌دهد که شدت نوار bf-dna تکثیرشده در حال حاضر به‌عنوان یک روش برای ارزیابی کیفیت جنین قبل از لانه‌گزینی کاربرد ندارد. به نظر می­رسد جنین­های دچار از دست دادان کروموزوم، بیشتر مستعد رهاکردن dna به bf هستند. عدم ارتباط مورفولوژی جنین با پلوئیدی نیاز به توسعه روش­های کم­تهاجمی غربالگری مبتنی بر وضعیت کروموزومی را نشان می­دهد.