the effect of the human cumulus cells-conditioned medium on in vitro maturation of mouse oocyte: an experimental study

Background: to increase the results of infertility treatment, many efforts have been made to improve the treatment methods. as assisted reproductive technology is mainly using cell culture methods, one of the approaches to improve this technology is conditioned medium from different sources. it is desirable to apply in vitro maturation (ivm) and use oocytes from normal cycles instead of stimulating ovulation. objective: to investigate the effect of human cumulus cell condition medium (hcccm) on the ivm of immature mouse oocytes and morphology. materials and methods: in this experimental study, 240 germinal vesile oocytes were collected from four-six wk-old mice after 48 hr of 5iu pregnant mare serum gonadotropin (pmsg) injection and cultured in hcccm (test group, n = 120) and dmem + 20% fbs (control group, n = 120). the ivm rates and changes in perivitelline space (pvs) and shape were investigated at 8, 16, and 24 hr following the culture. the mature (mii) oocytes were subjected to in vitro fertilization (ivf) and the fertilization rate was assessed in three days. results: a significant difference was observed between the maturation rates in the hcccm and control groups (24.16% vs 0%; p = 0.001), as well as morphologic changes between the two groups (p = 0.04, p = 0.05). the development rate for mii oocytes attained from ivm in the hcccm group was 27.58% (2-cell) and 6.89% (4-cell). data displayed that hcccm is an effective medium for oocytes maturation compared to the control medium. conclusion: hcccm supports oocyte in vitro growth and maturation. moreover, hcccm changes the oocyte shape and size of perivitelline space.

اثر محیط شرطی شده سلول های کومولوس انسانی روی بلوغ آزمایشگاهی اووسیت موش: یک مطالعه تجربی

مقدمه: برای افزایش نتایج درمان ناباروری، تلاش های زیادی برای بهبود روش های درمان انجام شده است. از آنجا که تکنیک های کمکی تولیدمثل (ART) عمدتا از روش های کشت سلولی استفاده می کنند، یکی از روش های بهبود این فناوری، محیط های شرطی شده حاصل از منابع و گونه های مختلف است. بهتر است به جای تحریک تخمک گذاری، از بلوغ آزمایشگاهی (IVM) استفاده و از تخمک های چرخه طبیعی استفاده شود.هدف: در این مطالعه تأثیر محیط شرطی شده حاصل از سلول های کومولوس انسانی (hCCCM) بر میزان IVM تخمک های موش نابالغ و مورفولوژی آنها بررسی شده است.مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، 240 تخمک مرحله ژرمینال وزیکول (GV) از موش های 4 تا 6 هفتگی نژاد NMRI پس از 48 ساعت تزریق 5 واحد PMSGجمع آوری شد. تخمک های GV بدون کومولوس در hCCCM (گروه آزمون، 120 عدد) و DMEM + 20% FBS (گروه کنترل، 120 عدد) برای IVM کشت داده شدند. گروه کنترل شبیه گروه کنترلی است که در قسمت دیگر پروژه استفاده شده و اخیراً منتشر شده است. میزان IVM و تغییرات شکل و PVS در هر دو گروه آزمون و کنترل در 8، 16 و 24 ساعت بعد از کشت بررسی شدند. تخمک های بالغ (MII) برای IVF استفاده شدند و میزان باروری بعد از 24، 48 و 72 ساعت ارزیابی شد.نتایج: تفاوت معنی داری بین میزان بلوغ در گروه hCCCM و کنترل (16/24% در مقابل 0%؛ 001/0 =p) مشاهده شد. همچنین در تغییرات مورفولوژیکی بین دو گروه تفاوت معنی داری مشاهده شد (05/0 =p و 04/0 =p). میزان تکوین تخمک های MII بدست آمده از IVM در گروهhCCCM 58/27 % (2 سلولی) و 89/6% (4 سلولی) بود. داده های این مطالعه نشان داد که hCCCM یک محیط مؤثر برای بلوغ تخمک های نابالغ در مقایسه با محیط کنترل است.نتیجه گیری: این یافته ها تأیید می کند که hCCCM از رشد و بلوغ آزمایشگاهی تخمک پشتیبانی می کند. علاوه بر این، hCCCM شکل تخمک و اندازه فضای پری ویتلین تخمک را تغییر می دهد.