lysophosphatidic acid supports the development of vitrified ovarian follicles by decreasing the incidence of cell death: an experimental study

Background: lysophosphatidic acid (lpa) contributes to follicular activation, oocyte maturation, in vitro fertilization, and embryo implantation. objective: this study was designed to evaluate the effects of lpa to improve the development of isolated follicles derived from whole mouse cultured vitrified ovaries. materials and methods: in this experimental study, first, the 1-wk-old mouse ovaries in the non-vitrified and vitrified groups were cultured in the presence of 20 µm of lpa for 1 wk. then, their isolated preantral follicles were cultured individually for 12 days in the presence or absence of 40 µm of lpa. the following evaluations were done for the cultured follicles: a viability test using calcein am staining, flow cytometry using annexin v/pi, and analysis of the expression of genes by real-time reverse transcription polymerase chain reaction. the maturation rates of the oocytes were compared among groups and some of the released metaphase ii oocytes were subjected to in vitro fertilization. results: in all lpa treated groups, the rates of survival and follicular development were higher, and the incidence of cell death and expression of pro-apoptotic genes were lower, than in the non-lpa supplemented groups (p = 0.035). there was no significant difference between the vitrified and non-vitrified groups regarding follicular or oocyte development, but the expression of bad and lpa receptors genes was significantly altered in the vitrified lpa supplemented group in comparison with the non-vitrified lpa supplemented group (p = 0.028). conclusion: lpa improved the survival and developmental potential of the isolated follicles. despite some alterations in the expression of apoptosis-related genes in the vitrified ovaries, lpa had positive effects on the survival and development of these follicles.

لیزوفسفاتیدیک اسید تکوین فولیکولی را همراه با کاهش وقوع مرگ سلولی حمایت می کند: یک مطالعه تجربی

مقدمه: لیزوفسفاتیدیک اسید (LPA) در فعال سازی فولیکول، بلوغ و لقاح تخمک، لانه گزینی جنین نقش دارد.هدف: این مطالعه جهت بررسی اثرات LPA بر بهبود تکوین فولیکول های ایزوله شده از تخمدان های کامل منجمد شده و کشت شده موشی در محیط کشت طراحی گردید.مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی ابتدا تخمدان منجمد شده و نشده موش های یک هفته ای ابتدا در محیط کشت حاوی 20 میلی مول LPA به مدت یک هفته کشت شدند. سپس فولیکول های پره انترال از آنها جدا شده و در حضور مقدار 40 میلی مول LPA دوباره به شکل انفرادی به مدت 12 روز کشت شدند و مطالعات بعدی بروی آنها انجام شد: تست زنده مانی با بکارگیری رنگ آمیزی کلسئین AM، فلوسیتومتری با استفاده از آنکسین v و Pi و بررسی بروز ژن ها با بکارگیری real timeRTPCR. میزان بلوغ تخمک ها در گروه های با هم مقایسه شدند و تعدادی از تخمک های MII برای لقاح بکارگرفته شدند.نتایج: در تمام گروه های تحت تیمار با LPA میزان زنده مانی و تکوین فولیکول ها بیشتر بود و همچنین وقوع مرگ سلولی و بروز ژن های پیش برنده اپوپتور در مقایسه با گروه های بدون تیمار کمتر بود (035/0 = p) و از حیث تکوین فولیکولی تفاوتی بین گروه های انجمادی و غیرانجمادی دیده نشد اما از نظر بروز ژن Bad و ژن گیرنده های LPA در گروه انجمادی تیمار شده با LPA تفاوت معنی داری با گروه غیرانجمادی تیمار شده با LPA وجود داشت (028/0 = p).نتیجه گیری: LPA باعث بهبود زنده مانی و تکوین فولیکول های جدا شده شد. علی رغم تغییراتی که در بروز ژن های مرتبط با آپوپتوز در گروه انجمادی رخ داده بود اما LPA اثرات مثبتی بر زنده مانی و تکوین این فولیکول ها داشت.