the reaggregation of normal granulosa-cumulus cells and mouse oocytes with polycystic ovarian syndrome in vitro: an experimental study

Background: the dialogue between oocytes and their surrounding cells plays a major role in the progress of oocyte meiosis and their developmental potential. objective: this study aimed to evaluate the effect of co-culture of normal granulosacumulus cells (gccs) with oocytes from polycystic ovarian syndrome (pcos) mice. materials and methods: normal gccs were collected from 10 virgin adult naval medical research institute female mice (30-35 gr, 7-8 wk old), and were cultured in an alpha-minimum essential medium supplemented with 5% fetal calf serum for 24-48 hr (1×106 cells/well). then, germinal-vesicle oocytes from pcos mice were cultured in the presence of cultured normal gccs (experimental group) and without gccs (control group). the maturation rate and quality of the pcos oocytes were examined by evaluating tfam and cx43 gene expression (real-time pcr) and the connection among pcos oocytes and normal gccs after 24 hr of culture. results: the co-culture of normal gccs and pcos oocytes in the experimental group led to the formation of a complex called a pcos oocyte-normal gccs complex. the maturation rate of these complexes was significantly increased compared to that of the control group (p ≤ 0.001). a significant difference was also found in the expression of cx43 (p ≤ 0.001) and tfam (p < 0.05) genes in the experimental group compared with the control group. the connection between pcos oocytes and normal gccs was observed in the scanning electron microscope images. conclusion: co-culture with normal gccs improves the capacity of pcos oocytes to enter meiosis, which may result in the promotion of assisted reproduction techniques.

تجمع مجدد سلول های گرانولوزا-کومولوس طبیعی و تخمک های موش با سندروم تخمدان پلی کیستیک، در شرایط آزمایشگاهی: یک مطالعه تجربی

مقدمه: ارتباط بین تخمک ها و سلول های احاطه کننده آنها نقش عمده ای در جهت پیشرفت میوز و پتانسیل تکوینی تخمک ایفا می‌کنند.هدف: این مطالعه جهت ارزیابی اثر هم کشتی سلول های کومولوسگرانولوزای طبیعی (GCCs: Granulosa cumulus cells) با تخمک‌ها از موش هایی با سندروم تخمدان پلی کیستیک (PCOS: Polycystic ovarian syndrome) طراحی شد.مواد و روش ها: سلول های کومولوسگرانولوزای طبیعی از ۱۰ موش NMRI ماده بالغ (۳۵۳۰ گرم، ۸۷ هفته) جمع آوری شد و در محیط کشت MEM alpha; تأمین شده با ۵% سرم جنین گاوی به مدت ۴۸۲۴ ساعت کشت داده شدند ( cells/well۱۰۶ ×۱). سپس، تخمک های حباب زاینده از موش‌هایی با سندروم تخمدان پلی کیستیک در حضور GCCs طبیعی کشت داده شده (گروه تجربی) و بدون حضور GCCs (گروه کنترل) کشت داده شدند. میزان بلوغ آزمایشگاهی و کیفیت تخمک های PCOs به ‌وسیله ارزیابی بیان ژن TFAM (qReal TimePCR) و Cx43 و ارتباط بین تخمک های PCOs و GCCs طبیعی بعد از ۲۴ ساعت از کشت دنبال شد.نتایج: هم کشتی GCCs طبیعی و تخمک های PCOs در گروه تجربی کمپلکسی بنام کمپلکس GCCsطبیعیتخمک PCOs تشکیل داد. میزان بلوغ این کمپلکس ها به طور معنی داری در مقایسه با گروه کنترل افزایش یافت (۰۰۱/۰ >p ). تفاوت معنی داری در بیان ژن‌های Cx43 (001/0 > p) و TFAM (03/0 = p) در گروه تجربی در مقایسه با گروه کنترل پیدا شد. همچنین ارتباط بین تخمک های PCOs و GCCs طبیعی در تصاویر میکروسکوپ الکترونی نگاره مشاهده شد.نتیجه گیری: هم کشتی با GCCs طبیعی منجر به بهبود پتانسیل تخمک های PCOs برای ورود به تقسیمات میوزی می شود که ممکن است منتج به بهبود تکنیک های کمک باروری شود. کلمات کلیدی: PCOs، هم کشتی، سلول های کومولوی گرانولوزا، IVM، Cx43.