effect of conditioned medium of umbilical cord-derived mesenchymal stem cells as a culture medium for human granulosa cells: an experimental study

Background: the umbilical cord-derived mesenchymal stem cells conditioned medium (uc-mscs-cm) produces secretomes with anti-apoptotic properties, and has the potential to prevent apoptosis of granulosa cells (gc) during controlled ovarian hyperstimulation. objective: to observe the effect of uc-mscs-cm on the interaction between proand anti-apoptotic proteins and the influence of growth differentiation factor 9 (gdf9) production in gc. materials and methods: uc-mscs-cm was collected from umbilical cord stem cell culture on passage 4. gc from 23 women who underwent in vitro fertilization were cultured and exposed to uc-mscs-cm for 24 hr. then rna of the gc was extracted and the mrna expression of bcl-2 associated x (bax), survivin and gdf9 were analysed using quantitative real-time pcr. the spent culture media of the gc were collected for measurement of insulin growth factor 1 using elisa. results: the expression of bax was significantly different after uc-mscs-cm exposure (4.09e-7 vs. 3.74e-7, p = 0.02). no significant changes occurred in survivin, bax/survivin ratio, and gdf9 expression after uc-mscs-cm exposure (p > 0.05). the igf-1 level of the cm was significantly higher after the cm was used as a culture medium for gc (2.28 vs. 3.07 ± 1.72, p ≤ 0.001). a significant positive correlation was found between survivin and gdf9 (r = 0.966, p ≤ 0.001). conclusion: igf-1 produced by uc-mscs-cm can work in paracrine fashion through the igf receptor, which can inhibit bax and maintain gdf9 production. moreover, under the influence of uc-mscs-cm, gc are also capable of producing igf-1, which can impact gc through autocrine processes.

تأثیر محیط شرطی شده سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بند ناف به عنوان محیط کشت برای سلول های گرانولوزای انسانی: یک مطالعه تجربی

مقدمه: محیط شرطی شده سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بند ناف (UCMSCsCM) ترشحاتی با خواص ضد آپوپتوتیک تولید می کند و این پتانسیل را دارد که از آپوپتوز سلول های گرانولوزا (GC) در طی تحریک کنترل شده تخمدان جلوگیری کند.هدف: مشاهده اثر UCMSCsCM بر تعامل بین پروتئین های پرو و ضد آپوپتوز و تأثیر تولید فاکتور تمایز رشد 9 (GDF9) در GC بود.مواد و روش ها: UCMSCsCM از کشت سلول‌های بنیادی بند ناف در پاساژ 4 جمع‌آوری شد. GCs از 23 زن که تحت لقاح آزمایشگاهی قرار گرفته بودند، کشت داده شدند و به مدت 24 ساعت در معرض UCMSCsCM قرار گرفتند. سپس RNA GC استخراج شد و بیان mRNA مربوط به BCL2 X (BAX)، survivin و GDF9 با استفاده از Realtime PCR کمی آنالیز شد. محیط کشت مصرف شده GC برای اندازه گیری فاکتور رشد انسولین 1 با استفاده از روش الایزا، جمع آوری شد. نتایج: بیان BAX پس از قرار گرفتن در معرض UCMSCsCM به طور قابل توجهی متفاوت بود (4.09E7 در مقابل 3.74E7، 02/0 = p). پس از قرار گرفتن در معرض UCMSCsCM هیچ تغییر قابل توجهی در survivin، نسبت BAX/survivin و بیان GDF9 رخ نداد (05/0 < p). سطح IGF1 CM پس از استفاده از CM به عنوان محیط کشت برای GC به طور قابل توجهی بالاتر بود (28/2 در مقابل 72/1 ± 07/3، 001/0 ge;p ). همبستگی مثبت و معناداری بین Survivin و GDF9 یافت شد (966/0 = r، 001/0 ge; p).نتیجه گیری: IGF1 تولید شده توسط UCMSCsCM می‌تواند به روش پاراکرین از طریق گیرنده IGF کار کند که می‌تواند BAX را مهار کرده و تولید GDF9 را حفظ کند. علاوه بر این، تحت تأثیر UCMSCsCM، GCها همچنین قادر به تولید IGF1 هستند که می تواند GC را از طریق فرآیندهای اتوکرین تحت تأثیر قرار دهد.