the expression of mir-17 and mir-29a in placenta-derived exosomes in lps-induced abortion mice model: an experimental study

Background: the expression pattern of micrornas in placenta-derived exosomes plays a crucial role in the regulation of immune responses and inflammation at the fetal–maternal interface. objective: considering the immunomodulatory properties of mir-17 and mir- 29a, we determined their expression levels in placenta-derived exosomes in a lipopolysaccharide (lps)-induced abortion mice model. materials and methods: a total of 14 pregnant balb/c mice, aged 6–8 wk, were randomly divided into two groups (n = 7/each) on the gestational day 11.5. while the mice in the experimental group were treated with lps, those in the control group were treated with phosphate buffered saline; 5 hr after the treatment, the placental cells were isolated and cultured for 48 hr. then, the cell culture supernatants were collected and used for isolation of exosomes. the isolated exosomes were confirmed by western blot and scanning electron microscopy. the mirnas were then extracted from exosomes, and cdna synthesized. the expression levels of mir-17 and mir-29a were evaluated by quantitative real-time pcr analysis. results: our results showed that the expression levels of mir-29a in placenta-derived exosomes obtained from the experimental group increased significantly compared to the control group. also, the expression levels of mir-17 in the placenta-derived exosomes obtained from the experimental group were found to decrease; however, it did not show significant changes compared with the control group (p > 0.05). conclusion: inflammatory reactions at the fetal–maternal interface can alter mirnas expression patterns in placenta-derived exosomes, especially mirnas with immunomodulatory effects such as mir-29a.

بیان miR-17 و MiR-29a در اگزوزوم‌های مشتق از جفت در مدل موشی سقط القاء شده توسط لیپوپلی ساکارید

مقدمه: الگوی بیان میکرو RNA ها در اگزوزوم های مشتق شده از جفت نقش مهمی در تنظیم پاسخ های ایمنی و التهاب در سطح تماس مادر و جنین دارند.هدف: با توجه به ویژگی های تنظیم کنندگی ایمنی miR17 و miR29a، ما میزان بیان آنها را در اگزوزوم های مشتق از جفت در یک مدل موشی سقط القاء شده توسط لیپوپلی ساکارید تعیین کردیم.مواد و روش ها: در مجموع 14 موش BALB/c شش تا هشت هفته ای در روز 5/11 حاملگی بصورت تصادفی به دو گروه تقسیم شدند (تعداد = 7 سر در هر گروه). در گروه آزمایش موش ها با لیپوپلی ساکارید و در گروه کنترل با بافر فسفات نمکی تیمار شدند. پنج ساعت پس از تیمار، سلول های جفتی جدا شده و به مدت 48 ساعت کشت داده شدند. سپس مایع رویی کشت سلولی جمع آوری و برای جداسازی اگزوزوم ها استفاده شد. اگزوزوم های جدا شده توسط وسترن بلات و میکروسکوپ الکترونی عبوری تأیید شدند. سپس miRNA ها از اگزوزوم ها استخراج شده و cDNA سنتز شد. سطح بیان miR17 و miR29a توسط realtime PCR کمی ارزیابی شد.نتایج: نتایج نشان داد که میزان بیان miR29a در اگزوزوم های مشتق از جفت به دست آمده از گروه لیپوپلی ساکارید به طور قابل توجهی در مقایسه با گروه کنترل افزایش داشت. همچنین میزان بیان miR17 در اگزوزوم های مشتق شده از جفت به دست آمده از گروه لیپوپلی ساکارید کاهش یافت، اما در مقایسه با گروه کنترل این تغییرات معنادار نبود (05/0 < p).نتیجه گیری: واکنش های التهابی در سطح تماس مادر و جنین می توانند الگوی بیان miRNA های درون اگزوزوم های مشتق شده از جفت و بطور خاص miRNA های دارای اثرات تنظیم کننده سیستم ایمنی مانند miR29a را تغییر دهند.