protective effects of hesperetin on the quality of sperm, apoptosis, lipid peroxidation, and oxidative stress during the process of cryopreservation: an experimental study

Background: hesperetin is a bioflavonoid compound, largely used in chinese traditional medicine and found plenty in citrus fruits. hesperetin has beneficial effects against different diseases. the sperm cryopreservation process is a common method that is used in infertility laboratories. it has been reported that during the cryopreservation process, the quality of sperm is significantly reduced. objective: to investigate the effect of hesperetin on the quality of human spermatozoa during the cryopreservation process. materials and methods: in this experimental study, 22 sperm sample of normozoospermia men who reffered to the infertility department of the shariati hospital (tehran, iran) between october and november 2019 were collect and divided in to three groups as: 1) fresh, 2) control (frozen-thawed group without treatment), and 3) treatment group as frozen-thawed samples supplemented with 20 μm hesperetin. motility, viability, morphology, apoptotic-like changes, intracellular h2o2, intracellular o2−, and lipid peroxidation (lpo) was measured. results: hesperetin treatment during the cryopreservation process of human sperm significantly improved the viability, motility, and morphology rates of the spermatozoa after frozen-thawed process in control group (p < 0.01). in addition, it significantly reduced the reactive oxygen species (ros) level, lpo level and increased the percentage of viable sperm cells with intact plasma membrane (p < 0.01) after frozenthawed process. conclusion: hesperetin can improve the quality of human sperm and also protect human sperm against reactive oxygen species, lpo, and apoptosis during the cryopreservation-thawing process.

اثر محافظتی هسپرتین روی کیفیت اسپرم، آپوپتوز، پراکسیداسیون لیپیدی، و گونه‌های واکنشی اکسیژن در طول فرایند انجماد

مقدمه: هسپرتین یک ترکیب bioflavonoid می باشد که به طور وسیع در طب سنتی چین استفاده می شود و در مرکبات citrus به میزان زیادی پیدا می شود. هسپرتین اثرات مفیدی در برابر بیماری های مختلف دارد. فرایند انجماد اسپرم یک روش معمول می باشد که در آزمایشگاه های ناباروری انجام می شود. گزارش ها حاکی از آن است که در طی فرایند انجماد کیفیت اسپرم به طور معنی داری کاهش می یابد.هدف: هدف مطالعه حاضر تحقیق در مورد اثر هسپرتین روی کیفیت اسپرم انسان در طی فرایند انجماد می باشد.مواد و روش ها: نمونه های اسپرم 22 مرد با نمونه نرمال به 3 گروه: 1) گروه تازه، 2) گروه کنترل، 3) گروه درمان تقسیم شدند که به گروه درمان هسپرتین 20 میکرومولار اضافه شد. تحرک اسپرم با استفاده از آنالیزهای اسپرم به کمک کامپیوتر (CASA)، زنده مانی بوسیله رنگ آمیزی ائوزین/نگروزین، و مورفولوژی با رنگ آمیزی Diff quickارزیابی شدند. تغییرات شبه آپوپتوزی با فلوسایتومتری، H2O2 و O2 به ترتیب با استفاده از 2ʹ, 7ʹdichlorofluorescin diacetate (DCFHDA) و dihydroethidium (DHE) و به وسیله فلوسایتومتری اندازه گیری شدند. همچنین پراکسیداسیون لیپیدی (LPO) با استفاده از کیت مالون دی آلدهید (MDA) آنالیز شد.نتایج: درمان با هسپرتین در طول فرایند انجماد اسپرم انسان میزان زنده مانی (001/0 >p)، تحرک (05/0 >p)، و مورفولوژی (01/0 >p) را در مقایسه با گروه کنترل به طور معنی داری افزایش داده است. بعلاوه در گروه درمان، هسپرتین میزان ROS (01/0 >p)، LPO (01/0 >p)، و میزان آپوپتوزر (001/0 >p) را در مقایسه با گروه کنترل کاهش داده است.نتیجه گیری: هسپرتین توانست کیفیت اسپرم انسان را بهبود ببخشد و همچنین توانست از اسپرم انسان در برابر ROS، LPO، و آپوپتوز در طول فرایند انجماد و ذوب محافظت کند.