culture density of menstrual blood-derived stromal/stem cells determines the quality of t cell responses: an experimental study

Background: menstrual blood-derived stromal/stem cells (menscs) are a new population of refreshing and highly proliferative stem cells. immunomodulatory effects of menscs profoundly depend on their relative density. objective: to find whether menscs cultured at varying numbers would differentially affect the allogenic peripheral blood mononuclear cells (pbmcs) key features. materials and methods: pbmcs were co-cultured with various menscs numbers. pbmcs proliferation was investigated via 3h-thymidine incorporation. flow cytometry was used to assess human leukocyte antigen (hla)-dr, hla-abc, hla-g, and costimulatory markers on menscs and the percentage of regulatory t cells (tregs) among pbmcs. the concentration of cytokines was determined in supernatant of co-cultures. results: the support of pbmcs proliferation at low menscs densities correlated with higher levels of pro-inflammatory interferon gamma (ifn-γ) in menscs/pbmcs co-culture and increased expression of hla-dr by menscs. on the other hand, the suppressive property of menscs at higher densities was independent of treg frequency, but correlated with a high concentration of interleukin (il)-6 and il-10 in the co-cultures. conclusion: totally, at different seeding densities, menscs could differentially interact with pbmcs leading to significant changes in the level of anti- and/or pro-inflammatory factors. these preliminary in vitro results are suggested to be taken into consideration in experimental models of mensc-based immunomodulation. nonetheless, for efficient utilization of menscs anti-inflammatory features in pre-clinical disease models, we still need to broaden our knowledge on mensc-immune system cross-talk; this could play a part in designing more optimized menscs injection modalities in the case of future pre-clinical and subsequently clinical settings.

تعداد سلول های بنیادی استرومایی خون قاعدگی کیفیت پاسخ های سلول T را تعیین می کند

مقدمه: سلول های بنیادی استرومایی خون قاعدگی (MenSCs) بعنوان یک منبع جدید تجدید شونده با توانایی تکثیر بالا از سلول های می باشند. توانایی این سلول ها در تعدیل پاسخ های ایمنی بطور واضحی به تعداد آنها بستگی دارد. هدف: در این مطالعه ما برآن بودیم تا بررسی کنیم که آیا مقادیر مختلف سلول های MenSCs می توانند تأثیرات متفاوتی روی میزان تکثیر سلول های آلوژن تک هسته ای خون محیطی (PBMC) و همچنین تولید فاکتورهای التهابی و غیرالتهابی داشته باشد.مواد و روش ها: سلول های MenSCs با نسبت های مختلف با سلول های PBMC کشت داده شدند سپس تکثیر سلول های PBMC با کمک تیمیدین نشان دار بررسی شد. برای بررسی بیان HLADR, HLAABC, HLAG و همچنین مارکرهای کمک تحریکی روی سلول های MenSC از فلوسایتومتری استفاده شد. درصد سلول های Treg در جمعیت PBMC ها نیز با فلوسایتومتری اندازه گیری شد. درنهایت غلظت سایتوکاین ها در سوپ همکشتی با روش الیزا سنجیده شد.نتایج: تکثیر بیشتر سلول های PBMC در همکشتی با سلول های MenSCs با تعداد کم، با افزایش میزان سایتوکاین IFN gamma; در سوپ همکشتی و در نتیجه افزایش بیان HLADR در سطح سلول های MenSCs همراه بود. از طرف دیگر فعالیت مهاری سلول های MenSCs در تعداد بالا با درصد سلول های Treg مرتبط نبود ولی با مقادیر بالای غلظت سایتوکاین هایIL10 و IL6 در همکشتی ارتباط داشت.نتیجه گیری: به طور کلی به نظر می رسد که سلول های MenSCs در تعداد مختلف به طور متفاوتی با سلول های PBMC برهمکنش دارند که این موضوع باعث تولید مقادیر متفاوتی از فاکتورهای التهابی و ضدالتهابی می گردد. نتایج این کار می تواند در استفاده های درمانی از MenSCs در تنظیم پاسخ های ایمنی مورد استفاده قرار گیرد. با این حال، برای استفاده بهینه از ویژگی ضدالتهابی MenSCs در مدل های پری کلینیکال بیماری، باید اطلاعاتمان را در مورد برهمکنش MenSCs با سلول های ایمنی افزایش دهیم. این امر می تواند نقش مهمی در طراحی استراتژی های بهینه ترزیق MenSCs در مطالعات پری کلینیکال و کلینیکال آینده داشته باشد.