bovine oocyte developmental competence and gene expression following co-culturing with ampullary cells: an experimental study

Background: there is no sufficient information on the impact of bovine ampullary oviductal epithelial cells (baoecs) on in vitro oocyte maturation competence and gene expression. objective: this study aimed to examine the oocyte developmental competence following co-culturing with a monolayer of fresh and frozen-thawed ampullary cells. materials and methods: bovine cumulus-oocyte complexes (cocs) were distributed into three groups: control group; where in cocs were cultured in cell-free media for 24 hr and fml and ftml groups in which the cocs were cultured in maturation media for 18 hr and then transferred into a media containing fresh and frozen-thawed baoecs monolayer, respectively (baoecs were extracted from the oviducts of slaughtered cattle and were then cultured freshly or frozen-thawed) for a further 6 hr. after 24 hr, the expanded cocs were evaluated for nuclear maturation, fertilization rate, and gene expression (gdf9, star, casp3, and fshr). results: nuclear maturation rate in the ftml group was significantly higher than the control group (p = 0.02). the fertilization rate of ftml group was significantly higher than the control and fml groups (p = 0.05 and p = 0.03, respectively). in terms of gene expression, gdf9 were upregulated in the presence of the baoecs during the last 6 hr of the in vitro maturation (p < 0.001). furthermore, the expression of the star gene in the ftml group was higher than the other groups (p = 0.02). conclusion: ampullary cells co-culturing (especially frozen-thawed cells) for in vitro maturation of bovine oocytes yields encourages the results and demonstrates the beneficial effect of co-culture on gene expression and developmental competence.

تأثیر بلوغ آزمایشگاهی تخمک در محیط حاوی تک nلایه سلول های آمپولای تازه و منجمد شده بر روی شایستگی تکاملی و بیان ژن‌های تخمک گاو

مقدمه: اطلاعات کافی در زمینه تأثیر سلول های اپیتلیال ناحیه آمپولای اوویداکت گاو بر ویژگی های تکاملی تخمک وجود ندارد.هدف: هدف از مطالعه حاضر بررسی تأثیر کشت همزمان تخمک گاو و سلول‌های آمپولای تازه و منجمد شده بر ویژگی های بلوغ تخمک و میزان لقاح آزمایشگاهی می باشد.مواد و روش ها: کمپلکس های تخمککومولوس پس از جمع آوری به سه گروه تقسیم شدند. گروه کنترل: تخمک ها به مدت 24 ساعت در محیط استاندارد بدون سلول کشت داده شدند، گروه تک لایه سلولی تازه و گروه تک لایه سلولی منجمد: در این گروه ها تخمک ها به مدت 18 ساعت در محیط استاندارد کشت داده شدند و سپس به محیط حاوی تک لایه سلول های آمپولای تازه یا منجمد شده منتقل شده و به مدت 6 ساعت در این محیط کشت داده شدند. سلول‌ها از اویداکت گاوهای کشتاری استخراج و به صورت تازه یا منجمد شده استفاده شدند. پس از این زمان کمپلکس های تخمک کومولوس به لحاظ بلوغ آزمایشگاهی، بیان ژن (GDF9،STAR ، CASP3 و FSHr) و میزان لقاح آزمایشگاهی مورد ارزیابی قرار گرفتند.نتایج: نتایج مطالعه حاضر نشان داد که میزان بلوغ آزمایشگاهی در گروه تک لایه سلولی منجمد به شکل معنی داری بیشتر از گروه کنترل بود (02/0 =p ). میزان لقاح نیز در این گروه نسبت به گروه کنترل و گروه تک لایه سلولی تازه به شکل معنی داری بالاتر بود (به ترتیب با 05/0 = p و 03/0 = p). در ارتباط با تغییرات بیان ژنی، بیان ژن GDF9 در گروه های کشت همزمان با سلول به شکل معنی داری بالاتر از گروه کنترل بود (001/0 > p). همچنین بیان ژن StAR در گروه تک لایه سلولی منجمد به شکل معنی داری بالاتر از سایر گروه ها بود (02/0 = p).نتیجه گیری: استفاده از کشت همزمان با سلول های آمپولا برای بلوغ آزمایشگاهی تخمک باعث بهبود تکامل تخمک و بیان ژن های مربوط به تکامل تخمک در گاو می شود.