the effect of human amniotic epithelial cell on dendritic cell differentiation of peripheral blood monocytes: an experimental study

Background: the amniotic membrane plays an important role in maintaining a healthy pregnancy. the main population cells from amniotic membrane include human amnion epithelial cells (haecs) which have been shown to possess immunomodulatory properties. objective: the proximity of haecs with monocyte leads to the generation of tollerogenic dendritic cells. materials and methods: haecs were obtained from normal pregnancy. peripheral blood monocytes were isolated by anti-cd14 macs method. co-cultures of monocytes and haecs were established in transwell chambers supplemented with granulocytemacrophage colony-stimulating factor (gm-csf) and interleukin-4 (il-4) in the absence and presence of lipopolysaccharide (lps) to produce immature and mature dcs, respectively. immunophenotyping of the obtained dcs was done through flow cytometry and the production of cytokines was measured by elisa. mixed leukocyte reaction (mlr) was also performed for the functional assessment of dcs. results: immunophenotyping of [haecs - immature dc (idc)] and [haecs - idc] + lps cells revealed that the expression of cd1a, cd80, cd86, cd40, hla-dr, and cd83 markers showed no significant difference as compared with the control group (idcs and mdcs alone). in the [haecs-idcs] + lps cells, the percentage of cd14 cells at the ratio of 1:2.5 showed significant differences compared to the control group. the production of il-10 and il-12 showed no significant difference in any of the cultures as compared to the control groups. also, co-cultured dcs did not inhibit proliferation of lymphocyte. conclusion: our findings show that factors secreted from cultured haecs are unable to generate of tollerogenic dendritic cells. to achieve a better understanding of other mechanisms more investigations are needed.

تأثیر سلول های پرده آمنیوتیک انسانی بر تمایز سلول های دندریتیک از منوسیت های خون محیطی: یک مطالعه تجربی

مقدمه: پرده آمنیون نقش مهمی را در حفظ یک حاملگی سالم بازی می کند. سلول های اپیتلیال پرده آمنیوتیک انسانی از مهمترین جمعیت های سلولی پرده آمنیون است که ویژگی های ایمونومدولاتوری یا تعدیل سیستم ایمنی از خود نشان داده است.هدف: بررسی اینکه مجاورت سلول های اپیتلیال پرده آمنیوتیک انسانی با مونوسیت ها به تولید سلول های دندریتیک تولروژنیک منجر می شود.مواد و روش ها: سلول های اپیتلیال پرده آمنیوتیک از حاملگی نرمال استخراج شد. از منوسیت های خون محیطی با روش MACS (سورتینگ سلولی) با آنتی CD14 جدا شد. منوسیت های تخلیص شده در حضور اینترلوکین 4 و فاکتور محرک کلونی گرانولوسیت مونوسیت در پلیت های ترانس ول به منظور تمایز به سمت سلول های دندریتیک نابالغ و بالغ در حضور و عدم حضور لیپوپلی ساکارید کشت داده شدند. بررسی ایمنوفنوتیپ سلول های دندریتیک حاصل توسط فلوسایتومتری و سایتوکین های تولید شده توسط الیزا انجام شد. بررسی عملکرد سلول های دندریتیک حاصل توسط واکنش مختلط لوکوسیتی انجام شد.نتایج: بیان مارکرهای سطحی, CD14, CD1a, CD80, CD86, CD40, HLADR and CD83، ترشح سایتوکین های IL12 و IL10، توانایی القای تکثیر لنفوسیت ها در واکنش MLR و القای تولید سلول های Treg در سلول های دندریتیک مشتق از مونوسیت بین دو گروه تست و کنترل (عدم حضور سلول های اپیتلیال پرده آمنیون) اختلاف معنی داری نشان نداد.نتیجه گیری: فاکتورهای ترشحی از کشت سلول های اپیتلیال پرده آمنیون قادر به القای تولید سلول های دندریتیک تولروژنیک نیستند. انجام بررسی های بیشتر جهت درک بهتر پیشنهاد می شود.