homing of adipose stem cells on the human amniotic membrane as a scaffold: a histological study

Background: the human amniotic membrane (ham) is a suitable and effective scaffold for cell culture and delivery, and adiposederived stem cells (adscs) are an important source of stem cells for transplantation and chondrogenic differentiation.objective: to assess the practicability of a cryopreserved ham as a scaffold in cell proliferation and differentiation in vitro.materials and methods: in this experimental study, adipose tissue samples were harvested from the inguinal region of male patients aged 1530 years. flow cytometry was used to identify cd31, cd45, cd90, and cd105 markers in adipose stem cells. ham was harvested from donor placenta after cesarean section, washed, trypsinbased decellularized trypsinized decellularized, and used as a scaffold via three methods: 1) adscs were differentiated into chondrocytes on cell culture flasks (monolayer method), and after 14 days of culture, the cells were transferred and cultured on both sides of the ham; 2) adscs were cultured and differentiated directly on both sides of the ham for 14 days (scaffoldmediated differentiation); and 3) chondrocytes were differentiated with micromass culture for 14 days, transferred on ham, and tissue slides were histologically analyzed qualitatively.results: flow cytometry confirmed the presence of mesenchymal stem cells. histological findings revealed that the cells adhered and grew well on the stromal layer of ham. among the three methods, scaffoldmediated differentiation of adscs showed the best results.conclusion: adscs have excellent attachment, viability, and differentiation capacity in the stromal side of ham. additionally, the direct culture and differentiation of adscs on ham is more suitable than the culture of differentiated cells on ham.

استفاده از پرده آمنیون به عنوان داربستی مناسب برای کشت و تمایز کندروژنیک سلول های بنیادی مشتق از بافت چربی: یک مطالعه تجربی

مقدمه: پرده آمنیون انسانی (HAM) یک داربست مناسب و موثر برای کشت و انتقال سلول می باشد. و سلول های بنیادی مشتق از بافت چربی (ADSCs) در بدن یکی از مهمترین منابع سلول بنیادی برای پیوند هستند. هدف: هدف از مطالعه حاضر ارزیابی قابلیت پرده آمنیون فریز شده به عنوان داربست برای تکثیر و تمایز سلول در شرایط in vitro می باشد.مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، نمونه های بافت چربی از ناحیه اینگوینال بیماران مرد با رنج سنی 3015 سال جداسازی شد. به منظور تعیین هویت سلول های بنیادی چربی از فلوسایتومتری برای شناسایی مارکرهای CD31، CD45، CD90 و CD105 استفاده شد. پرده آمنیون از جفت فرد دهنده بلافاصله پس از سزارین تهیه شد و پس از شستشو، تریپسینه کردن، و آسلولار کردن، از پرده آمنیون به عنوان داربست به 3 روش استفاده گردید: 1) سلول های بنیادی چربی به روش مونولایر و به مدت 14 روز در داخل فلاسک به کندروسیت تمایز یافته، سپس بر روی هر دو سمت پرده انتقال یافتند. 2) سلول های بنیادی بر روی هر دو سطح پرده آمنیون و به مدت 14 روز، کشت و تمایز کندروژنیک پیدا کردند (تمایز بر روی داربست). 3) تمایز کندروژنیک به مدت 14 روز و با تکنیک ریزتوده انجام شد، سپس بر روی پرده منتقل شد. در نهایت نمونه ها بصورت کیفی با ارزیابی هیستولوژیکی بررسی شدند.نتایج: فلوسیتومتری حضور سلولهای بنیادی مزانشیمی را تأیید کرد. یافته های هیستولوژیکی نشان داد که سلول ها اتصال و رشد بسیار خوبی بر روی سطح استرومایی پرده آمنیون داشته اند. از میان سه روش ذکر شده، تمایز بر روی داربست بهترین نتیجه را داشته است.نتیجه گیری: سلول های بنیادی بافت چربی اتصال، زیست پذیری و پتانسیل تمایزی مناسب و خوبی بر روی سطح استرومایی پرده آمنیون دارند. علاوه بر این، کشت و تمایز مستقیم ADSC بر روی HAM مناسب تر از کشت سلول های تمایز یافته بر روی HAM است.