The Effect of Adding Rosmarinic and Ascorbic Acids To Vitrification Media on Fertilization Rate of the Mice Oocyte: An Experimental Study

Background: oocytes vitrification is a pivotal step for the widespread and safekeeping of animal genetic resources. oocytes endure notable morphological and functional damage during cryopreservation. oxidative stress is one of the adverse effects that vitrification imparts on oocytes. objective: in the present study, we investigated the antioxidant effect of rosmarinic and ascorbic acids on the quality and fertilizing ability of frozenthawed mice oocyte.materials and methods: in this experimental study, germinal vesicle oocytes obtained from twomonthsold (30 -40g) nmri mice were randomly divided into four groups. the basic cryoprotectants were 7.5% (v/v) ethylene glycol+7.5% (v/v) propanediol as an equilibration media. vitrification medium contained 15% (v/v) ethylene glycol+15% (v/v) propanediol, and 0.5 m sucrose. in the first group (control), nothing was added to vitrification mediums, whereas, in the second and third groups, 0.5 mmol/l of ascorbic acid and 105 micro;mol/l of rosmarinic acid were added into vitrification medium, respectively. the cumulative concentration of rosmarinic and ascorbic acids were added to group 4. mouse oocytes were vitrified and preserved for one month. the thawed oocytes were transferred into the alpha;mem medium (alpha minimum essential medium) and maintained in this medium for 24 hr, to be matured and reach the metaphase ii stage.results: the addition of rosmarinic and ascorbic acids to the vitrification solution improved the survival, maturation of germinal vesicles, fertilization rate, and finally development to 4cell stage. maturation rates to 4cell stage for ascorbic acid, rosmarinic acid, and both of them together were 80%, 80.76%, and 86.61%, respectively.conclusion: these results indicate that the addition of a cumulative concentration of 0.5 mmol/l ascorbic acid and 105 micro;mol/l of rosmarinic acid to the cryopreservation solution for the mouse immature oocytes would be of significant value (p< 0.01).

بررسی اثر افزودن رزمارینیک و آسکوربیک اسید به محیط انجمادی تخمک‌های موش، بر میزان باروری آنها

مقدمه: انجماد تخمک ها یک مرحله حیاتی برای گسترش و حفظ منابع ژنتیکی حیوانات است. تخمک ها در طی پروسه انجماد از آسیب های مورفولوژیکی و عملکردی قابل توجهی رنج می برند. استرس اکسیداتیو یکی از عوارض نامطلوبی است که انجماد بر تخمک ها اعمال می کند.هدف: در مطالعه ی حاضر، اثرات آنتی اکسیدانی اسید آسکوربیک و اسید رزمارینیک را بر کیفیت باروری تخمک های موش فریز -دفریز شده مورد بررسی قرار داده ایم.موارد و روش ها: محلول پایه شامل پروپاندیول (7/5%) و اتیلن گلیکول (7/5%) بعنوان محیط تعادلی بوده و از پروپاندیول (15%)، اتیلن گلیکول (15%) و سوکروز نیم مولار بعنوان محیط انجمادی استفاده شد. در گروه اول (کنترل) هیچ ماده به محیط انجمادی افزوده نشد، در گروه های دوم و سوم به ترتیب نیم میلی مول اسید آسکوربیک و 105میکرومول اسید رزماری به محیط انجمادی افزوده گشت. در گروه چهارم ترکیب دوزهای مشابه اسیدرزماری و اسید آسکوربیک به محیط انجمادی اضافه گردید. تخمک های موش برای مدت یک ماه در حالت انجماد حفظ شدند.نتایج: افزودن اسید آسکوربیک و اسید رزماری به محلول انجماد، بقا و بلوغ تخمک های ژرمینال و نیز میزان لقاح و رشد به مرحله 4 سلولی را بهبود بخشید. اسید اسکوربیک موثرتر از اسید رزماری بوده و زمانی که این دو ماده به شکل ترکیبی به محیط انجمادی اضافه شدند اثرات مطلوب تری بر کیفیت و تکامل پس از انجماد جنین ها اعمال کردند.نتیجه گیری: این نتایج نشان می دهد که اضافه کردن غلظت تجمعی نیم میلی مول اسید آسکوربیک و 105میکرومول اسید رزماری به محیط انجمادی تخمک های ژرمینال موش اثرات کیفی ارزشمندی بر بقاء و بلوغ آنها دارد.