جداسازی و شناسایی مولکولی قارچ‌های بیماری‌زا از سوسری‌های بیمارستان‌های آموزشی شهرستان بابل، سال 1401-1400

زمینه و هدف: سوسری‌ها ناقلان بالقوه‌ی طیف وسیعی از میکروارگانیسم‌های بیماری‌زا(قارچ‌ها، باکتری‌ها و انگل‌ها) هستند. با توجه به اهمیت این حشرات در انتقال قارچ‌های بیماری‌زا و تاثیر آن‌ها بر سلامت افراد بستری در بیمارستان، مطالعه‌ی حاضر با هدف جداسازی و شناسایی مولکولی قارچ‌های بیماری‌زا از سطوح خارجی و داخلی سوسری‌های جمع‌آوری شده از سه بیمارستان آموزشی شهرستان بابل، استان مازندران، ایران، طراحی گردید.روش بررسی: سوسری‌ها به روش دستی استریل صید شدند و پس از شستشو برای رفع آلودگی سطحی با الکل اتیلیک 70 درصد به‌مدت 2 دقیقه، 100 میکرو‌لیتر از محلول‌های استخراج شده از سطوح خارجی و داخلی سوسری‌ها بر روی محیط سابورودکستروز آگارحاوی کلرامفنیکل 0/05 درصد کشت داده شد و در دمای 30 درجه سانتی‌گراد به‌مدت 3 هفته انکوبه گردید. کلنی‌های مختلف مخمری و رشته‌ای با استفاده از روش‌های قارچ‌شناسی استاندارد متمایز شدند. جهت تمایز بین‌گونه‌ای مخمر کاندیدا از روش pcr-rflp و آنزیم محدودکننده‌ی msp i، و جنس آسپرژیلوس ازآنزیم‌های محدودکننده‌ی bln i و alw i، استفاده گردید.یافته‌ها: در مجموع 85 جدایه قارچی از کل 50 سوسری مورد مطالعه شامل 15 مورد سوسری آلمانی(30%)، 20 مورد آمریکایی(40%) و 15 مورد نوار قهوه‌ای(30%) جداسازی شد که شامل 52 جدایه از سطوح خارجی(61%) و 33 جدایه از سطوح داخلی سوسری‌ها(39%) بود. از تعداد کل 49 قارچ رشته‌ای، 16 مورد آسپرژیلوس فومیگاتوس(32/65%) و از تعداد کل 36 مخمر شناسایی شده، 14 مورد کاندیدا آلبیکنس(38/89%) از شایع‌ترین قارچ‌های جداسازی شده در این مطالعه بودند. سایر قارچ‌های رشته‌ای و مخمری جداشده از سوسری‌ها شامل آسپرژیلوس نایجر 11 مورد(22/45%)، 8 مورد آسپرژیلوس فلاووس(16/32%)، 4 مورد پنی‌سیلیوم(8/2%)، 3 مورد رایزوپوس(6/1%)، 3 مورد کلادوسپوریوم(6/1%)، 2 مورد موکور(4%)، 2 مورد آلترناریا(4%)، 6 مورد کاندیدا پاراپسیلوزیس(16/67%)، 12 مورد کاندیدا کروزه‌ای(33/33%)، 3 مورد کاندیدا گلابراتا(8/33%)، و یک مورد کاندیدا تروپیکالیس(2/78%) بودند.نتیجه‌گیری: باتوجه به جداسازی گونه‌های مختلف قارچی از سوسری‌ها و اهمیت آن‌ها در انتقال مکانیکی احتمالی عفونت‌های شایع قارچی در بیمارستان‌ها، در صورت عدم ضدعفونی پیشگیرانه‌ی منظم محیط بیمارستان، این حشرات می‌توانند منبع انتقال مداوم عفونت باشند.

isolation and molecular identification of pathogenic fungi from cockroaches caught from babol teaching hospitals during 2021-2022

background and aim: cockroaches are potential carriers of a wide range of pathogenic microorganisms (fungi, bacteria and parasites). considering the importance of these insects in the transmission of pathogenic fungi and their impact on the health of hospitalized people, the aim of this study was isolation and molecular identification of pathogenic fungi from the external and internal surfaces of cockroaches collected from three educational hospitals of babol city, mazandaran province, iran.materials and methods: cockroaches were caught by a sterile manual method and after washing to remove surface contamination with 70% ethyl alcohol for 2min, 100 µl of the solutions from the external and internal parts of cockroaches were cultured on sabouraud’s dextrose agar with 0.05% chloramphenicol and incubated at 30 °c for 3 weeks. the different yeast and filamentous colonies were distinguished using standard mycological methods. the pcr-rflp method and the restriction enzymes msp i and bln i were used for the differentiation of candida species, and the restriction enzyme alw i for aspergillus species.results: a total of 85 fungi species/genera were isolated from all 50 studied cockroaches, including german cockroaches 15 (30%), american cockroach 20 (40%) and brown 15 (30%), which included 52 isolates from external surfaces (61%) and 33 isolates from internal surfaces of cockroaches (39%). of the total number of 49 filamentous fungi, aspergillus fumigatus 16 (32.65%) and out of the total number of 36 yeasts identified, candida albicans 14 (38.89%) were the most common fungi isolated in this study. other filamentous fungi and yeasts isolated from cockroaches include aspergillus niger 11 (22.45%), aspergillus flavus 8 (16.32%), penicillium 4 (8.2%), rhizopus 3 (6.1%), cladosporium 3 (6.1%), mucor 2 (4%), alternaria 2 (4%), candida parapsilosis 6 (16.67%), candida krusei 12 (33.33%), candida glabrata 3 (8.33%), and candida tropicalis 1 (2.78%) were isolated.conclusion: considering the isolation of several fungal species from cockroaches and their importance in the possible mechanical transmission of common fungal infections in hospitals, these insects can be a source of continuous transmission of infection, if there is no regular preventive disinfection of the hospital environment.