هم‌افزایی لینزولید و ریفامپین در مبارزه با جدایه‌های محیطی انتروکوکسی مقاوم به چند دارو

زمینه و هدف: فاضلاب ﻳﻜﻲ از خطرناک‌ترین و مهم‌ترین منابع اﻧﺘﺸﺎر ﺑﺎﻛﺘﺮی‌های بیماری‌زاست و تصفیه و تیمار آن‌ها همواره مویدحذف باکتری‌های بیماری‌زا نیست. انتروکوک‌ها به‌عنوان باکتری‌های بیماری‌زای فرصت‌طلب، سخت‌رشد و عامل عفونت‌های بیمارستانی، پراکندگی محیطی وسیعی دارند که یکی از مسیرهای انتقال آن‌ها به انسان، آب و فاضلاب می‌باشد. افزایش میزان مقاومت آنتی‌بیوتیکی در بین باکتری‌ها نشان دهنده نیاز به بررسی عوامل ضدباکتریایی جدید یا اثرات ترکیبی آن‌هاست. این ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ با هدف بررسی اثر ترکیبی لینزولید و ریفامپین در حذف انتروکوک‌های ﻣﻘﺎوم به چند آﻧﺘﻲﺑﻴﻮﺗﻴﻚ در دو پایگاه تصفیه ﻓﺎﺿﻼب استان گلستان انجام شد. روش بررسی: گونه‌های انتروکوک از 80 نمونه‌ی حاصل از پایگاه‌های تصفیه فاضلاب در دو شهر استان گلستان (شمال ایران) شامل گرگان و بندرترکمن طی بهمن 1399 تا تیر1400 جدا شدند. جدایه ها بر اساس روش‌های تعداد احتمالی باکتری‌ها، فیلتراسیون، تست‌های میکروبیولوژیک و نهایتاً با استفاده از ردیابی ژن اختصاصی توسط پرایمر ddle با روش واکنش زنجیره‌ای پلیمراز شناسایی شدند. الگوی مقاومت آنتی‌بیوتیکی با روش کربی بائر و طبق دستورالعمل 2020-clsi نسبت به شش کلاس آنتی‌بیوتیکی انجام شد. تعیین حداقل غلظت لینزولید در حالت منفرد و در ترکیب با ریفامپین با روش میکرودایلوشن براث انجام شد. یافته‌ها: پس از بررسی فنوتیپی و تشخیص مولکولی (pcr) نمونه‌های فاضلاب خام و تیمارشده، در 40% نمونه‌های فاضلاب(32 نمونه) گونه‌های انتروکوک شناسایی گردیدند. تتراسایکلین کم‌اثرترین آنتی‌بیوتیک گزارش شد؛ به‌طوری‌که حدود 100 درصد جدایه‌های انتروکوکوس‌فکالیس و انتروکوکوس‌فاسیوم به آن مقاومت نشان دادند. فراوانی انتروکوکوس‌فکالیس مقاوم به لینزولید 11% تایید شد. در مجموع، 20 جدایه انتروکوکی(%62/5) دارای مقاومت چندگانه بودند. حداقل غلظت مهاری لینزولید و ریفامپین که رشد %90 جدایه‌ها را مهار کرد(mic90) 1 میکروگرم بر میلی‌لیتر و 4 برابر کمتر از فرم منفرد لینزولید(4 میکروگرم بر میلیلیتر= mic90) بود. ضمن این‌که هیچ یک از جدایه‌های انتروکوکی به ترکیب لینزولید/ ریفامپین مقاومتی نشان ندادند(0/001=p). نتیجه گیری: ﻧﺘﺎﻳﺞ ﺣﺎﺻﻞ از اﻳﻦ ﺗﺤﻘﻴﻖ، ﺣﻀﻮر انتروکوکسی‌های ﻣﻘﺎوم به ونکومایسین و سایر آنتی‌بیوتیک‌ها را در تصفیه‌خانه ﻓﺎﺿﻼب تایید نمود. اثر مطلوب ترکیب لینزولید و ریفامپین در مهار کامل جدایه‌های انتروکی مقاوم به چند دارو، دلالت بر هم‌افزایی آن‌ها داشت.

synergism of linezolid and rifampin to combat multidrug-resistant environmental enterococci isolates

background and aim: wastewater is one of the most dangerous and important sources of pathogens and their treatment does not always guarantee the elimination of pathogenic bacteria. enterococci, as opportunistic pathogenic bacteria, fastidious and cause of nosocomial infections, have a wide environmental distribution and one of the routes of their transmission to humans is water and wastewater. the increasing rate of drug- resistance among bacteria indicates the need for investigation of novel antibacterial agents or their combination effects. the aim of this study was to investigate the effect of linezolid in combination with rifampin on the elimination of multidrug- resistant enterococci in two treatment plants in golestan province. materials and methods: enterococcus species from eighty samples were isolated from treatment plants in two cities of the golestan province (north of iran) including gorgan and bandar-e torkaman during january-june 2021. the isolates were identified based on the most probable number (mpn), filtration, microbiological tests and finally by using specific gene detection by ddle primer with polymerase chain reaction. kirby bauer performed an antibiotic resistance pattern according to clsi- 2020 guidelines for six classes of antibiotics. the minimum inhibitory concentration of linezolid was determined individually and by synergist effect with rifampin by broth microdilution method. results: after phenotypic and molecular diagnosis (pcr) of raw and treated wastewater samples, in 32 (40%) wastewater samples, enterococci species were identified and confirmed. tetracycline was the least effective so, about 100% of enterococcus faecalis and enterococcus faecium isolates were resistant to it. the prevalence of linezolid-resistant e. faecalis was 11%. a total of 20 enterococcal isolates (62.5%) had multiple resistance. the concentration of linezolid in combination with rifampin, which inhibited 90% growth of the isolates (mic90) was 1μg /ml, four-fold lower than linezolid alone (mic90=4 μg/ml). in addition, none of the enterococci isolates showed resistance to the linezolid/rifampin combination (p=0.001).conclusion: the results of this research confirmed the presence of enterococci resistant to vancomycin and other antibiotics in the wastewater treatment plant samples in golestan province. the favorable combination effect of linezolid and rifampin on the inhibition of multi-drug resistant isolates implies their synergy.